A zátonyanalízis pozitív. Szifilisz tesztek: mi a neve, hogyan kell bevenni, melyik a legmegbízhatóbb? A szifilisz laboratóriumi diagnózisának eredményeinek klinikai értékelése

A szifilisz a Treponema pallidum spirocheta által okozott fertőző betegség, amely progresszív krónikus lefolyásra hajlamos, és a klinikai tünetek egyértelműen periodizálódnak.

A szexuális terjedés túlsúlya a kontaktussal és a placentán át történő terjedéssel szemben a szexuális úton terjedő betegségek (STD-k, STI-k) közé sorolja ezt a betegséget. A fertőzés átvitelének ezen módjai mellett különleges szerepet játszik a mesterséges út (a latin „artificio” szóból - mesterségesen létrehozott).

Gyógyintézetekre jellemző, főként kórházi környezetben valósul meg. A fertőzés vérátömlesztés, különféle sebészeti beavatkozások és invazív diagnosztikai módszerek során következik be.

Az adományozott vér karanténja ellenére továbbra is aktuális a szifilisz azonosításának problémája a donorokban a betegség különböző szakaszaiban.

Ezért a szifilisz diagnosztikai intézkedései szabványosítást, új érzékeny és informatív azonosítási módszerek bevezetését, valamint a hibák és a vizsgálati eredmények helytelen értelmezésének minimalizálását teszik szükségessé.

    Mutasd az összeset

    1. A laboratóriumi diagnosztikai módszerek osztályozása

    A szifilisz diagnózisának van néhány jellemzője, és eltér más bakteriális fertőzések diagnózisától. A Treponema pallidum összetett szerkezete és antigén tulajdonságai hibákat okoznak a szerológiai reakciók eredményeinek értelmezésében.

    A betegek 3 fő csoportját ajánlják fel a szifilisz vérvizsgálatára:

    1. 1 Lakossági csoportok szűrése és orvosi vizsgálata (beleértve a terhességet, a terhesgondozói regisztrációt, a foglalkoztatást és a kórlap nyilvántartását stb.).
    2. 2 Szűrés kockázati csoportokban (védtelen szex szifilisszel fertőzött személlyel, erőszakos szexuális érintkezést követően, HIV-fertőzöttek stb.).
    3. 3 A betegség tüneteit mutató személyek vagy szifilitikus fertőzésre gyanús személyek.

    Az összes laboratóriumi módszert hagyományosan közvetlen és közvetett módszerre osztják.

    1.1. Közvetlen módszerek

    1. 1 A Treponema pallidum azonosítása sötét mezőben (sötétmezős mikroszkópia).
    2. 2 Kísérleti állatok fertőzése (tenyésztés laboratóriumi állatokban).
    3. 3 PCR (polimeráz láncreakció).
    4. 4 DNS próba vagy nukleinsav hibridizáció.

    1.2. Közvetett módszerek

    A szerológiai reakciók olyan laboratóriumi diagnosztikai módszerek, amelyek a Treponema pallidum antigének (rövidítve AG) elleni antitestek (rövidítve AT) kimutatásán alapulnak. Ezek elsődleges fontosságúak a diagnózis megerősítésében.

    1. 1 Nem treponemális tesztek:
      • Wasserman reakció (WRS);
      • Mikroprecipitációs reakció (MR, RMP) és analógjai, amelyeket alább adunk meg;
      • Gyors plazma reagin teszt (RPR, RPR);
      • Red Toluidine Serum Test (TRUST);
      • Nem treponemális teszt a Nemi Betegség Kutató Laboratóriumban - VDRL.
    2. 2 Treponemalis teszt:
      • Treponema pallidum immobilizációs oldat – RIBT/RIT;
      • Immunfluoreszcens oldat - RIF, FTA (szérumhígítások RIF-10, RIF-200, RIF-abs);
      • A passzív hemagglutináció R-ciója (RPGA, TRPGA, TPHA);
      • Enzim immunoassay (ELISA, EIA);
      • Immunblot vizsgálat.

    1. ábra – A szifilisz szerodiagnózisának algoritmusa

    1.3. Hisztomorfológiai módszerek

    Ezek a módszerek a szifilitikus megnyilvánulások hisztomorfológiájának jellemzőinek azonosítására vezetnek. Figyelmet fordítanak a chancre szerkezetének finomságaira. A fertőzések szövettani differenciáldiagnózisa azonban nagyon nehéz. A hisztomorfológiát más laboratóriumi és klinikai vizsgálatokkal együtt alkalmazzák.

    2. A Treponema pallidum sötétterű mikroszkópiája

    Ez a módszer a treponema pallidum közvetlen kimutatásán alapul a vizsgált anyagban mikroszkóp és speciális eszközök segítségével (leggyakrabban eróziókból és fekélyekből származó váladékok, ritkábban agy-gerincvelői folyadék és egyéb szubsztrátok).

    Az eróziókból, fekélyes hibákból szikrázással, kaparással, préseléssel váladékot nyerünk, majd az elkészített készítményt mikroszkóp alatt megvizsgáljuk.

    A treponema pallidumot jellemzően chancre-ból, másodlagos friss, másodlagosan visszatérő szifilisz gócaiból, valamint a nyirokcsomók és a placenta pontjaiból mutatják ki.

    Azon a jelenségen alapuló, hogy a kis részecskék sötét mezőben világítanak, amikor fénysugár éri őket (Tyndall-jelenség), a módszer tökéletesen lehetővé teszi a szifilisz kórokozójának megkülönböztetését más treponémáktól a morfológiai és a mozgásmódbeli különbségek alapján. baktérium.

    A mikroszkópiához speciális, megfelelő optikai felbontású sötét mezős kondenzátort használnak. A drogot zúzott csepp módszerrel állítják elő (egy csepp anyagot tiszta, zsírmentes tárgylemezre helyeznek, és nagyon vékony fedőlemezzel lefedik).

    Merítőolajat csepegtetünk a fedőlemezre. A cső elfordításával és a nagyítólencse elforgatásával beállítható a kívánt megvilágítás.

    A mikroszkóp sötét mezejében vérsejteket, hámsejteket és a szifilisz kórokozóját észlelik. A Treponema pallidum spirálisnak tűnik, nagyon vékony, ezüstös színű, sima mozdulatokkal.

    2. ábra - Sötétmezős mikroszkóp, mint a Treponema pallidum vizualizálásának módja a vizsgált anyagban. Illusztráció forrása - CDC

    A Treponema pallidumot meg kell különböztetni más treponémáktól, beleértve a Tr-t is. refringens, amely az oropharynxban és a nemi szervek nyálkahártyáján található. Ez a baktérium kaotikus mozgást végez, széles és aszimmetrikus, meglehetősen durva fürtjei vannak. Ezenkívül a Treponema pallidum megkülönböztethető a Tr. Microdentium, Tr. Buccalis és Tr. vincenti.

    A baktériumok sötét mezőben való megjelenítését néha fluoreszcens reakció egészíti ki. Ebből a célból fluoreszcens festékkel jelölt antitreponemális antitesteket adnak a natív anyaghoz. Ebben az esetben antigén-antitest (rövidítve AG-AT) komplex képződik, amely fluoreszcens mikroszkóppal történő vizsgálat tárgya.

    3. Polimeráz láncreakciós (PCR) módszer

    A Treponema pallidum dezoxiribonukleinsav (DNS) molekulájának kimutatására 1991-ben kifejlesztett PCR rendkívül érzékeny és specifikus, lehetővé téve a kórokozó DNS-fragmenseinek kimutatását.

    Ez az elemzés a meghatározott paramétereknek megfelelő és a mintában jelenlévő, világos spirocheta DNS rövid szakaszainak másolására épül. Mindez mesterséges körülmények között (in vitro) történik. A reakciót egy eszközben hajtják végre - egy hőciklusban, amely biztosítja a hőmérsékleti ciklusok periodizálását. Lehűlés, majd a kémcsövek felmelegítése következik be 0,1˚C hibával.

    A DNS-templátot 2 percig 92-98 °C hőmérsékleten melegítjük (a maximális hőmérsékletet használjuk, ha a polimeráz hőstabil). Hevítéskor a DNS-szálak szétválnak a köztük lévő hidrogénkötések felbomlása miatt. Az illesztési lépésben a reakció hőmérsékletét csökkentjük, hogy a primer az egyszálú templáthoz kötődjön.

    A lágyítás körülbelül 30 másodpercet vesz igénybe, ezalatt több száz nukleotid szintetizálódik. Az újonnan szintetizált molekulákat a polimeráz másolja, aminek eredményeként a dezoxiribonukleinsav specifikus fragmensei szaporodnak. A fragmensek ezt követő kimutatását agar-gélelektroforézissel végezzük.

    A szifilisz PCR diagnosztikája még kísérleti jellegű, de indokolt veleszületett fertőzés kimutatásakor, összetett diagnosztikai esetekben, vagy ha a vizsgálati anyagban minimális a Treponema pallidum tartalom.

    4. DNS hibridizáció

    A DNS-hibridizációt in vitro hajtják végre, és két egyszálú DNS-molekula egy molekulává történő teljes vagy részleges összekapcsolásán alapul. A komplementer töredékek teljes megfeleltetése esetén könnyen megtörténik az összeolvadás. Ha a komplementer egyezés részleges, akkor a DNS-szálak kapcsolódása lassan megy végbe. A láncfúzió ideje alapján a komplementaritás mértéke értékelhető.

    Amikor a DNS-t pufferoldatban hevítik, a hidrogénkötéseket a komplementer nitrogéntartalmú bázisok felszakítják, ami a DNS-láncok szétválását okozza. Ezután két denaturált dezoxiribonukleinsavból gyógyszert állítanak elő. Lehűléskor az egyszálú régiók renaturálódnak. Egy úgynevezett DNS-hibrid keletkezik.

    A módszer lehetővé teszi az összeillesztési sebesség becslését és elemzését, figyelembe véve a DNS jellemzőit (hasonlóságait és különbségeit) a fajok között vagy egy fajon belül.

    A DNS-próba alkalmazása magában foglalja egy jelölt DNS-fragmens hibridizálását egy specifikus DNS-régióval, hogy azonosítsa a komplementer nukleotidszekvenciákat. A szonda jelölésére telítetlen atomok (kromoforok) vagy radioaktív izotópok csoportját használják.

    A DNS-próbát nukleinsavak heterogén és homogén kimutatására használják. A szonda szerepe az, hogy azonosítsa azokat a területeket, ahol a cél-szonda egyesülése megtörtént. A homogén rendszerben történő detektálásnak megvan az az előnye, hogy lehetővé teszi a DNS-molekulák hibridizációjának valós időben történő nyomon követését.

    A módszer lényege a DNS denaturáció és renaturáció (DNS-láncok újraegyesítése). A nukleinsav és a DNS próba renaturációjának folyamata egy „hibrid” képződésével ér véget.

    Specifikus nukleinsavszekvenciák hibridizálnak a DNS-próbával, és így kimutathatók, és lehetővé teszik a DNS mennyiségének becslését a vizsgált anyagban.

    5. Laboratóriumi állatok fertőzése

    A nyulak nagy érzékenysége a Treponema pallidumra (körülbelül 99,9%) lehetővé teszi a szifilitikus fertőzés diagnosztizálására való alkalmazásukat.

    A nyulak fertőzését kutatóközpontokban végzik, és ez az „arany standard” más módszerek érzékenységének felmérésére.

    Térjünk vissza a treponemális és nem treponemális tesztekhez, mivel ezeket használják leggyakrabban. Tekintsük ezek előnyeit és hátrányait, valamint az eredmények értelmezésének hibáit.

    6. Nem treponemális vizsgálatok

    Ezek a tesztek egy standardizált kardiolipin antigén elleni IgG és IgM antitestek meghatározására szolgálnak. Jelentős hátrányuk viszonylag alacsony specifitásuk.

    Az alacsony költség és a könnyű kivitelezés lehetővé teszi, hogy ezeket a vizsgálatokat a lakosság körében az előzetes diagnózis felállításához és szűréséhez szükséges diagnosztikai vizsgálatok közé soroljuk.

    Nem-treponemális vizsgálatokat kell elvégezni az orvosi lapra történő jelentkezéskor, állásra jelentkezéskor vagy terhesgondozói regisztrációkor.

    Hibák:

    1. 1 Minimális érzékenység az elsődleges szifilisz stádiumában – 70%;
    2. 2 Minimális érzékenység a késői szifilisz stádiumában – 30%;
    3. 3 Hamis negatív és álpozitív eredmények lehetősége;
    4. 4 Az RSK teljesítésének munkaintenzitása.

    Előnyök:

    1. 1 A tesztgyártás viszonylag alacsony költsége;
    2. 2 Gyors válasz fogadása;
    3. 3 Felhasználásuk lehetősége szűrésre.

    Hamis pozitív vagy gyengén pozitív minták vétele a következő esetekben lehetséges:

    1. 1 A végrehajtási technológia megsértése az AG-AT komplexum blokkolásakor.
    2. 2 A beteg autoimmun betegségben szenved (rheumatoid arthritis, reuma, scleroderma, szisztémás lupus erythematosus, sarcoidosis stb.).
    3. 3 Rosszindulatú daganatok.
    4. 4 Vírusos és bakteriális fertőzések.
    5. 5 Endokrin betegségek (autoimmun pajzsmirigy-gyulladás, diabetes mellitus).
    6. 6 Terhesség.
    7. 7 Alkoholfogyasztás.
    8. 8 Zsíros ételek fogyasztása.
    9. 9 Szenilis kor.

    Amint a listából látható, rengeteg oka van a helytelen eredménynek. Ezért nagyon óvatosnak kell lenni vele. Tekintsünk még két mintát az RSC-vel együtt. Ez egy mikroprecipitációs reakció és VDLR (annak módosítása).

    7. Komplement rögzítési reakció (RSK, Wasserman, RW)

    Ez egy olyan teszt, amely a komplement AG-AT komplexekhez való kötődési képességén alapul. A képződött komplexet a hemolitikus rendszer segítségével azonosítják. A kardiolipin antigén jelentősen növeli a teszt érzékenységét.

    A Kolmer-reakció is érzékeny, ami abból áll, hogy különböző hőmérsékleti körülmények között hajtják végre. Így a Kolmer-reakció első fázisa 20 °C-on fél órán át, a második fázis 4-8 °C-on 20 órán keresztül megy végbe. Ez idő alatt komplement rögzítés történik.

    Az RSC végrehajtása során drámaian pozitív eredményeket lehet elérni. Az ok valószínűleg az antitestek magas titere a hígítatlan szérumban. Ebben az esetben a vizsgálatokat csökkenő dózisokkal végezzük.

    A szifilisz stádiumainak megkülönböztetése és a szifilisz elleni kezelés hatékonyságának értékelése érdekében meghatározzák az AT mennyiségét a szérumban.

    A minta pozitivitását keresztezéssel értékeljük, a szérum hígítását a Wasserman-, Kolmer- és Kann-reakciók is jelzik.

    8. Mikroprecipitációs reakció

    Mivel a fenti vizsgálatok elvégzésének bonyolultsága nagy, ezért a szifilisz szerodiagnózisának gyorsított módszerét, az úgynevezett expressz módszert - mikroprecipitációs reakciót (rövidítve MR, RMP) fejlesztették ki, amely lefedi a különböző populációs csoportok klinikai vizsgálatának széles körét. .

    Kardiolipin antigénnel és segédanyagokkal végzik. Előnye a perifériás vér kutatási célú gyűjtése. Ez jelentősen felgyorsítja magát a technikát és a laboránsok munkáját is.

    2. ábra - Mikroprecipitációs reakció (séma)

    Az MR elvégzéséhez a beteg véréből plazma vagy inaktivált szérum szükséges (antitesteket tartalmaznak). Ezután a plazmát jelölt lyukakba helyezzük. Ezután egy csepp kardiolipin antigént adunk a vizsgált anyaghoz, összekeverjük és összerázzuk. Ennek eredményeként a fertőzött személy szérumában jellegzetes pelyhek jelennek meg, amelyek intenzitása változó.

    Ez egy minőségi minta. Kvantitatív értékeléshez 10 hígítású szérumot használunk, amelyeket 10 lyukba helyezünk megfelelő jelöléssel. A kvalitatív MR-nél a választ keresztek (plusz) vagy mínusz formájában jelzik a kvantitatív MR-rel, az antitest-titert (1:2, 1:4 stb.) jelzik.

    A pelyhek jelenléte pozitív vagy gyengén pozitív válasznak minősül. A pelyhesedés megjelenése betegség hiányában is lehetséges, ezért a kapott eredmény végső értékelése kontrollvizsgálat vagy egyéb reakciók (RIBT, RIF, ELISA, RPGA) után történik.

    9. VDRL

    Az Egészségügyi Világszervezet által javasolt lipoid antigénnel (AG) végzett reakció tesztelésének módszere joggal tekinthető a legjobbnak a többi standard nem treponemális teszt közül. Az USA-ban, Georgiában, a szexuális úton terjedő betegségek laboratóriumában (Venereal Diseases Research Laboratories) fejlesztették ki.

    Az intézmény rövidítése szolgált a minta elnevezéseként - VDRL. A VDRL az MR egy módosítása. A szifiliszben szenvedő beteg szérumát inaktiválják, és tárgylemezre helyezik. A felhasznált antigén változó százalékban kardiolipint, koleszterint és lecitint tartalmaz. A válasz szinte azonnal regisztrálásra kerül.

    A szérumban antitestek jelenlétében határozott flokkuláció lép fel. A szérum 4 hét fertőzés után válik reaktívvá. Az antitestek mennyiségének meghatározásához a szérumot exponenciálisan előhígítják.

    A VDRL előnyei:

    1. 1 viszonylag nagy érzékenység;
    2. 2 viszonylag magas specificitás;
    3. 3 egyszerű végrehajtás;
    4. 4 alacsony költségű reagensek;
    5. 5 gyors választ kapok.

    A VDRL hátránya a viszonylag magas hamis pozitív arány.

    Okai a fent felsorolt ​​betegségek.

    A treponemális teszteket specifikus Treponema pallidum antigénekkel végezzük. Ezek szükségesek és kötelezőek a végső diagnózis felállításához. Ezek az immunfluoreszcens reakció (RIF), az indirekt hemagglutinációs reakció (IPHA), az enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat (ELISA) stb.

    A nem-treponemális teszt (RPR, MP, VDRL) pozitív eredménye után mindig treponemális teszteket kell végezni (általában kombináció - RPGA, ELISA, RIF).

    A treponemális tesztek elvégzése bonyolultabb, mint a gyorstesztek, és több pénzt igényelnek.

    10. RIF

    Ezt a reakciót (rövidítve RIF) használják a szifilisz diagnosztizálására, beleértve a látens formákat, valamint a pozitív és hamis pozitív minták kétszeri ellenőrzésére.

    A RIF a jelölt antitestek izzásán alapul, amikor antigén-antitest komplexszel kombinálják kvarclámpa alatt. A módszert a 60-as években kezdték használni, és az egyszerű kivitelezés és a magas specifitás (amely kissé rosszabb, mint a RIBT) különböztette meg.

    Számos módosítása van: RIF-10, RIF-200 és RIF-abs.

    A RIF 10-szeres hígítás esetén a legérzékenyebb, a többi specifikusabb. A RIF két fázisban történik. A páciens vérszérumát hozzáadják az AG-hoz. AG-AT komplex képződik, amelyet a következő fázisban vizsgálunk. Ezután a fluorokrómmal jelölt komplexet mikroszkóppal azonosítják. Ha nem észlelünk fényt, ez azt jelzi, hogy a vérszérumban nincsenek specifikus antitestek.

    Az összes hígítás közül a RIF-200 a legértékesebb. A módszer a szifilisz különféle formáinak, különösen a látens szifilisz diagnosztizálására és a pozitív minták újraellenőrzésére szolgál.

    11. RIBT

    A Treponema pallidum (rövidítve RIBT, RIT) immobilizációs reakciója a komplex szerológiai vizsgálatok egyike, amely jelentős erőfeszítést és anyagi költségeket igényel. A RIBT-t egyre ritkábban használják, de jelentősége továbbra is fennáll a látens szifilisz diagnózisában.

    Nagy jelentősége van a hamis pozitív eredmények felismerésében terhes nőknél, és a baktériumok immobilizinek – késői antitestek – jelenlétében történő immobilizálásán alapul.

    Az eredményt az immobilizált treponémek százalékos aránya (%) alapján értékeljük egy speciális táblázat segítségével:

    1. 1 0-tól 20-ig - negatív teszt.
    2. 2 21-től 50-ig - gyengén pozitív teszt.
    3. 3 50-től 100-ig - pozitív reakció.

    A RIBT használatakor álpozitív eredmények is előfordulhatnak. Így helytelen válasz lehetséges a trópusi trepanematázokkal, valamint tuberkulózissal, májcirrózissal, szarkoidózissal és idős betegekkel való fertőzés során.

    12. RPGA

    Ezt a szifilisz vérvizsgálatát passzív hemagglutinációs tesztnek nevezik (rövidítve: RPHA, THRHA vérvizsgálat).

    Az RPHA antigénjét Treponema pallidum fragmentumokkal bevont (fertőzött nyulakból nyert) juh vörösvértestekből állítják elő (lásd 4. ábra). Az elemzéshez a páciens vénás vérét (plazmáját vagy inaktivált szérumát) használják.

    Ha egy szifiliszben szenvedő beteg szérumához antigént adnak, AG-AT komplex képződik, amely a vörösvértestek agglutinációjához vezet. az agglutinációt laboratóriumi technikus szubjektíven határozza meg.

    3. ábra – Az RPHA (passzív hemagglutinációs reakció) sémája

    A mintát akkor értékeljük pozitívnak, ha egyenletes rózsaszínű agglutinátumok jelennek meg. A csapadék vörös elszíneződése a vörösvértestek kicsapódását jelzi. Az RPGA nagyon érzékeny és nagyon specifikus.

    12.1. Mikrohemagglutinációs reakció

    Ez az RPGA egyszerűsített változata. Abban különbözik a fent leírt teszttől, hogy kevesebb antigént, hígítót és szérumot igényel a reakció végrehajtásához. 4 órával a szérum inkubálása után a minta értékelhető. A szifilisz szűrésére és tömeges vizsgálatára használják.

    13. Enzim immunoassay

    Az enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat (rövidítve ELISA) egy specifikus antigén-antitest reakción alapul. A biológiai anyagokat (beteg vérszéruma, agy-gerincvelői folyadék) olyan lyukakba vezetik, amelyek szilárd felületén a treponema pallidum antigéneket rögzítik. A tesztanyagot inkubáljuk, majd az antigénekhez nem kötődő antitesteket lemossuk (lásd 5. ábra).

    A kapott komplex azonosítása a fermentációs szakaszban történik az enzimmel jelölt immunszérum felhasználásával. Egy kémiai reakció során az enzim színezi a keletkező komplexeket. A festődés intenzitása a páciens vérében lévő specifikus antitestek mennyiségétől függ, és spektrofotométerrel rögzítik.

    4. ábra – Az ELISA (enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat) sémája

    Az ELISA érzékenysége több mint 95%. A módszert automatizált módban használják elektív populációs csoportok vizsgálatára: donorok, terhes nők és mások, a pozitív és hamis pozitív nem-treponemális tesztek diagnózisának tisztázására.

    14. Immunblot vizsgálat

    Az immunoblot nagyon érzékeny módszer, az egyszerű ELISA módosulata. A reakció a Treponema pallidum antigének elválasztásával végzett elektroforézisen alapul.

    Az elválasztott immundeterminánsokat nitrocellulóz papírra visszük, és ELISA-val előhívjuk. Ezután a szérumot inkubáljuk, és a meg nem kötött antitesteket lemossuk. A kapott anyagot enzimmel jelölt immunglobulinokkal (IgM vagy IgG) kezeljük.

    15. A szifilisz laboratóriumi diagnózisának eredményeinek klinikai értékelése

    Az alábbi 1. táblázatban megadtuk a lehetséges vizsgálati eredményeket és azok értelmezését. Amint a táblázatból látható, a megfejtés során elsődleges fontosságú a tesztek átfogó értékelése.

    1. táblázat - A szerológiai reakciók eredményeinek értelmezése (vérvizsgálatok szifiliszre). Megtekintéshez kattintson a táblázatra

    A teszt reakcióképességét „keresztekkel” is értékelik:

    1. 1 A maximális választ (élesen pozitív teszt) 4 kereszt jelzi.
    2. 2 A pozitív tesztet 3 kereszt jelzi.
    3. 3 A gyengén pozitív reakciót két kereszt jelzi.
    4. 4 Egy kereszt kétes és negatív eredményt jelöl.
    5. 5 A nemleges választ mínuszjellel jelöljük.

    A szifilisz laboratóriumi diagnosztikájának optimalizálásának problémája a mai napig nem veszítette el jelentőségét. A modern diagnosztikai módszerek a tudósok azon vágya ellenére, hogy a diagnosztikát a lehető legmagasabb érzékenységi és specifitási szintre hozzák, kontrollvizsgálatot és egyéni megközelítést igényelnek.

    A szifilitikus fertőzés egyik jellemzője a szerorezisztencia jelensége, amely soha nem kapott tudományos magyarázatot. A diagnózis a beteg teljes körű vizsgálata után történik epidemiológiai, klinikai és laboratóriumi módszerekkel.

    Az orvostudomány gazdasági és technikai fejlődésének hátterében a szifilisz diagnosztizálására vonatkozó új kritériumok kidolgozása terén is haladás figyelhető meg. Mindez lehetővé teszi a betegek gyors, sikeres és pontos kezelését.

A szifilisz jól ismert és meglehetősen gyakori betegség. Az esetek túlnyomó többségében szexuális úton terjed, de vannak más lehetőségek is, mint például vérátömlesztéssel, háztartási érintkezés útján történő fertőzés, vagy anyától szerzett veleszületett betegség.

A betegség azonosítása vagy megerősítése érdekében szükség lehet szifilisz-vizsgálatra. Nagyon gyakran ajánlott az ilyen vizsgálatokat orvosi vizsgálatok során elvégezni, mivel ez lehetővé teszi a fertőzött személyek időben történő azonosítását. De meg kell értenie, hogy nincs egyetlen elemzés, amely 100%-ban megbízható információt nyújtana, ezért mindig több további elemzést kell végeznie.

A szifilisz diagnózisa

A szifilisz vérvizsgálattal és tünetekkel diagnosztizálható, ha vannak. A pontosabb eredmény érdekében helyesen kell elvégeznie az elemzést. Vért kell adni reggel és csak éhgyomorra. Úgy, hogy az utolsó étkezés legalább 8 órával a vizsgálat előtt legyen. A vizsgálat előestéjén ne igyon alkoholt vagy a vízen kívül más folyadékot, és ne dohányozzon.

A modern laboratóriumok többféle szerológiai vérvizsgálatot is képesek elvégezni a szifilisz kimutatására:

  • RW vérvizsgálat lehetővé teszi a kórokozó jelenlétének azonosítását az emberi szervezetben és annak aktivitását, valamint meghatározza az előírt kezelés hatékonyságát. Az ilyen elemzések néha hibás eredményeket adnak.
  • RIF vérvizsgálatérzékenyebb, és lehetővé teszi a betegség korábbi szakaszaiban történő felismerését. Alkalmas a betegség lefolyásának lappangó időszakában történő diagnosztizálására.
  • ELISA elemzés lehetővé teszi az antitestek jelenlétének meghatározását a szervezetben a Treponema pallidumban - a szifilisz kórokozójában.
  • RPGA elemzés a betegség stádiumának megerősítésére végezzük. Nem független diagnosztikai tesztként használják, hanem csak másokkal kombinálva.
  • Vérvétel RIBT a hamis pozitív Wasserman-reakció felismerésére használják.

Elemzési átirat

A szifilisz minden szerológiai vérvizsgálata két nagy csoportra oszlik: nem specifikus (ez egy RW vérvizsgálat) és specifikus (RNGA, RIF, ELISA, RIBT tesztek).

  • A nem specifikus tesztek csak akkor adnak pozitív eredményt, ha egy személy beteg, és a gyógyulás után negatív eredményt adnak.
  • Speciális tesztek határozhatják meg a betegség elleni antitesteket az ember vérében. Kezelés után is pozitív eredményt adhatnak, ezért független diagnosztikai tesztként ritkán használják őket.

A legpontosabb eredmények elérése érdekében általában több különböző tesztet alkalmaznak, majd a szifilisz vérvizsgálatának dekódolása kicsit tovább tart, de a hatékonyság magasabb lesz.

Wasserman reakció vagy RW

A Wasserman-reakció vagy az RW pozitív eredményt mutathat körülbelül 5-8 héttel a fertőzés után, de néhány betegnél később következik be. Ahogy a kórokozók bejutnak a vérbe, a titer növekszik. Maximumát másodlagos friss szifilisznél éri el. Ezután az antitest-titer fokozatos csökkenése következik be, és a betegség késői formáiban a Wasserman-reakció gyakran negatív.

Ha az elemzés az antitesttiter éles csökkenését mutatja a kezelés során, ez a hatékonyságát jelzi. A szifilisz vérvizsgálatának eredményét általában egy szám formájában adják meg: 4 + - erősen pozitív, 3+ - pozitív, 2+ vagy 1+ gyengén pozitív vagy kétséges, és a „–” jel negatív tesztet jelez eredmény.

Az RW vizsgálat fő hátránya a specifitás hiánya. Gyakran hamis pozitív eredményeket ad más betegségben szenvedő betegeknél. Például egy ilyen elemzés pozitív lehet különböző kollagenózisokban (lupus erythematosus, scleroderma, rheumatoid arthritis stb.), bizonyos fertőző betegségekben, például lepra, mononukleózis, malária, kanyaró stb., valamint májbetegségekben, rosszindulatú daganatok, szívinfarktus. Hamis pozitív eredmények az alkohollal és drogokkal visszaélő, valamint teljesen egészséges embereknél is előfordulnak. Ezért, ha pozitív szifilisz tesztet kap, általában ajánlott további kutatást végezni treponemális tesztekkel.

Enzim immunoassay módszer

A treponemális tesztek közé tartozik az ELISA vagy az enzimhez kötött immunszorbens vizsgálati módszer. A vérvizsgálat ezzel a módszerrel történő értelmezésekor információkat kaphat a szifilisz elleni antitestekről, valamint azok titeréről és az immunglobulinok egy adott osztályához való tartozásáról.

A szifilisz legpontosabb vizsgálati eredményének elérése érdekében egy nem-treponemális teszt (RW) és két treponemális teszt elvégzése javasolt. Ha mindhárom teszt pozitív eredményt ad, akkor beszélhetünk a betegség jelenlétéről a betegben.

Ha ennek a szexuális úton terjedő betegségnek a legkisebb gyanúja is felmerül, azonnal forduljon orvoshoz. Javasolni fogja a szifilisz vizsgálatát, és megadja a szükséges útmutatást. Ezt a tesztet teljesen ingyenesen elvégezheti bármely felszerelt laboratóriummal rendelkező klinikán. Ha ezt névtelenül szeretné megtenni, kis díj ellenében felkereshet egy magánlaboratóriumot, ahol ilyen elemzést végeznek.

4,25 az 5-ből (8 szavazat) Primer szifilisz esetén chancroid váladékozást vagy pontszerű nyirokcsomókat vizsgálunk treponema pallidum szempontjából. Másodlagos szifilisz esetén az anyagot a bőrön lévő erodált papulák felületéről, nyálkahártyákról, repedésekről stb. veszik. Az anyag bevétele előtt, hogy megtisztítsák a különböző szennyeződésektől az elváltozások felületét (eróziók, fekélyek, repedések). ). A megtisztított felületet száraz pálcikával megszárítjuk, és platina hurokkal vagy spatulával enyhén irritáljuk a perifériás területeket, miközben egy gumikesztyűben ujjainkkal finoman összenyomjuk az elem alját, amíg a szövetfolyadék (szérum) meg nem jelenik, amelyből előkészítik a kutatásra való felkészülést. A szifilisz diagnosztizálásához fontos a szöveti folyadék kinyerése, mivel a treponema pallidum a nyirokkapillárisok lumenében, a nyirok- és erek körüli szöveti hasadékokban található.

Regionális nyirokcsomók punkciója

A nyirokcsomók feletti bőrt 96%-os alkohollal és 3-5%-os alkoholos jódoldattal kezelik. Ezután a bal kéz 1. és 2. ujjával rögzítse a nyirokcsomót. Jobb kezével vegyen egy steril fecskendőt néhány csepp izotóniás nátrium-klorid oldattal, amelyet a nyirokcsomó hossztengelyével párhuzamosan fecskendeznek be. A tűt különböző irányokba tolják a csomópont kapszula ellentétes falához, és lassan befecskendezik a fecskendő tartalmát. A bal kéz ujjaival enyhén masszírozzuk a nyirokcsomót. Amikor a tűt lassan kihúzzák, a fecskendő dugattyúját egyidejűleg kihúzzák, felszívva a nyirokcsomó tartalmát. Az anyagot tárgylemezre visszük (ha kicsi az anyag mennyisége, csepp izotóniás nátrium-klorid oldatot adunk hozzá), és fedőlemezzel letakarjuk. A natív drog vizsgálatát sötét látómezőben, fény-optikai mikroszkóppal, sötétmezős kondenzátorral (40, 7x, 10x vagy 15x objektív) végezzük. A Treponema pallidum színes készítményekben is megtalálható. A Romanovsky-Giemsa szerinti festéskor a halvány treponema rózsaszínű, Fontan és Morozov szerint - barna (fekete), a Burri módszer szerint a festetlen treponema sötét háttér előtt látható.

Szerológiai diagnózis

A szifilisz diagnosztizálásában, a kezelés hatékonyságának felmérésében, a gyógyulási kritérium felállításában és a látens, rezisztens formák azonosításában nagy jelentősége van a standard (klasszikus) és specifikus szerológiai reakcióknak. A standard vagy klasszikus szerológiai reakciók (SSR) a következők:
  • Wasserman reakció (WR),
  • Kahn és Sachs-Vitebsky üledékes reakciói (citokolikus),
  • reakció üvegen (expressz módszer),
konkrétan:
  • treponema pallidum immobilizációs reakció (treponema pallidum reakció),
  • immunfluoreszcens reakció (RIF).

Wasserman reakció (WR)

- A. Wasserman A. Neisserrel és C. Bruckkal közösen fejlesztette ki 1906-ban. A Wasserman-reakció a komplementkötés jelenségén (Bordet-Gengou reakció) alapul, és lehetővé teszi az anti-lipid antitestek (reagins) meghatározását. A modern elképzelések szerint a Wasserman-reakció a makroorganizmus lipidjei ellen termelt antitesteket, nem a Treponema pallidum-ot, és a reakció egy autoimmun folyamatot tár fel, amelyet a makroorganizmus szöveteinek a Treponema pallidum által okozott denaturációja lipoprotein komplex képződésével ( konjugátum), amelyben a lipidek (haptének) meghatározóak.

Az RV-t általában két vagy három antigénnel diagnosztizálják. A leggyakrabban használt nagyon érzékeny kardiolipin antigén (koleszterinben és lecitinben dúsított szarvasmarha szívkivonat) és treponemális antigén (anatogén tenyésztett treponemes pallidum ultrahangos szuszpenziója). Ezek az antigének a páciens szérumával együtt olyan immunkomplexet alkotnak, amely képes adszorbeálni és megkötni a komplementet. A képződött komplex (reaginok + antigén + komplement) vizuális meghatározásához indikátorként a hemolitikus rendszert (birka eritrociták és hemolitikus szérum keveréke) használják. Ha a reakció 1. fázisában komplement kötődik (reaginok + antigén + komplement), nem történik hemolízis - a vörösvérsejtek könnyen észrevehető csapadékká válnak ki (PB pozitív). Ha az 1. fázisban a komplement nem kötődik a reagin hiánya miatt a vizsgált szérumban, akkor a hemolitikus rendszer felhasználja, és hemolízis történik (RT negatív). A hemolízis súlyosságának mértékét az RV stádiumának meghatározásakor pluszokkal értékeljük: a hemolízis teljes hiánya ++++ vagy 4+ (RV élesen pozitív); alig kezdődött hemolízis +++ vagy 3+ (RV pozitív); jelentős hemolízis ++ vagy 2+ (RV gyengén pozitív); nem egyértelmű a hemolízis képe ± (RV kétséges); teljes hemolízis - (Wassermann reakció negatív).

A PB kvalitatív értékelésén túlmenően létezik egy kvantitatív értékelés is különféle szérumhígításokkal (1:10, 1:20, 1:80, 1:160, 1:320). A reagin titerét az a maximális hígítás határozza meg, amely még mindig élesen pozitív (4+) eredményt ad. Az RV kvantitatív stádiumának meghatározása fontos a szifilitikus fertőzés egyes klinikai formáinak diagnosztizálásában, valamint a kezelés hatékonyságának ellenőrzésében. Jelenleg a Wasserman-reakciót két antigénnel hajtják végre (kardiolipin és treponemális hangú Reiter-törzs). Az RV általában a fertőzés után 5-6 héttel a betegek 25-60%-ánál, 7-8 héten - 75-96%-ban, 9-19 hetesen - 100%-ban válik pozitívvá, bár az utóbbi években néha korábban. vagy későbbi . Ugyanakkor a reagin titer fokozatosan növekszik és eléri a maximális értéket (1:160-1:320 és afeletti) generalizált kiütések (másodlagos friss szifilisz) esetén. Ha az RV pozitív, az elsődleges szeropozitív szifilisz diagnózisa történik.
Másodlagos frissenés másodlagos kiújuló szifilisz, RV a betegek 100%-ában pozitív, de legyengült immunitású, kimerült betegeknél negatív eredmény figyelhető meg. Ezt követően a reagin titer fokozatosan csökken, és másodlagos visszatérő szifilisz esetén általában nem haladja meg az 1:80-1:120-at.
Harmadlagos szifiliszre Az RV a betegek 65-70%-ában pozitív, és általában alacsony reagin titer figyelhető meg (1:20-1:40). A szifilisz késői formáiban (belső szervek, idegrendszeri szifilisz) az esetek 50-80%-ában pozitív RV figyelhető meg. A reagin titer 1:5 és 1:320 között van.
Látens szifiliszre pozitív RV a betegek 100%-ában figyelhető meg. A reagin titer 1:80 és 1:640 között van, késői látens szifilisz esetén pedig 1:10 és 1:20 között. A reagin titer gyors csökkenése (a teljes negativitásig) a kezelés során a kezelés hatékonyságát jelzi.

A Wasserman-reakció hátrányai- elégtelen érzékenység (negatív az elsődleges szifilisz kezdeti szakaszában). Szintén negatív a betegek 1/3-ánál, ha korábban antibiotikum kezelésben részesült, harmadlagos aktív szifiliszben, bőr- és nyálkahártya elváltozásokkal, osteoartikuláris apparátusban, belső szervekben, központi idegrendszerben, valamint késői veleszületett betegeknél. szifilisz.
Specifikusság hiánya- a Wasserman-reakció pozitív lehet azoknál az embereknél, akik korábban nem szenvedtek szifiliszben, és nem is szenvednek szifiliszben. Különösen álpozitív (nem specifikus) RV eredményeket figyeltek meg szisztémás lupus erythematosusban, leprában, maláriában, rosszindulatú daganatokban, májkárosodásban, kiterjedt szívinfarktusban és egyéb betegségekben szenvedő betegeknél, és néha teljesen egészséges embereknél.
Rövid távú álpozitív Wasserman-reakció észlelhető egyes nőknél szülés előtt vagy után, kábítószer-fogyasztókban, érzéstelenítés vagy alkoholfogyasztás után. Az álpozitív RV általában gyengén expresszálódik, gyakran alacsony reagin titerrel (1:5-1:20), pozitív (3+) vagy gyengén pozitív (2+). A tömeges szerológiai vizsgálatok során a hamis pozitív eredmények gyakorisága 0,1-0,15%. Az elégtelen érzékenység leküzdésére hidegtesztet (Kolyar-reakció) alkalmaznak, és egyidejűleg más szerológiai reakciókkal is elvégzik.

Kahn és Sachs-Vitebsky üledékes reakciói

A Wasserman-reakciót kettővel kombinálva alkalmazzák üledékes reakciók (Kahn és Sachs-Vitebsky), amikor a szakaszba kerül, koncentráltabb antigének készülnek. Expressz módszer (mikroreakció üvegen) - lipidreakciókra vonatkozik, és a kicsapódási reakción alapul. Egy specifikus kardiolipin antigénnel helyezzük el, amelyből 1 cseppet 2-3 csepp vizsgált vérszérummal keverünk egy speciális üveglap lyukaiba.
Előny- a válasz fogadásának sebessége (30-40 perc alatt). Az eredményeket a lerakódott üledék mennyisége és a pelyhek mérete alapján értékelik. Az expresszivitás meghatározása: CSR - 4+, 3+, 2+ és negatív. Meg kell jegyezni, hogy a fals pozitív eredmények gyakrabban figyelhetők meg, mint az RV esetén. Az expressz módszert általában szifilisz tömeges vizsgálatára, klinikai diagnosztikai laboratóriumokban, szomatikus osztályokon és kórházakban végzett vizsgálatokhoz használják. Az expressz módszer eredményei alapján a szifilisz diagnosztizálása tilos terhes nőknél, donoroknál, valamint a kezelés utáni kontrollra is.

Treponema pallidum immobilizációs reakció (TPI)

Treponema pallidum immobilizációs reakció (TPI)- javasolta 1949-ben R. W. Nelson és M. Mayer. Ez a szifilisz legspecifikusabb diagnosztikai tesztje. A gyártás összetettsége és magas költsége azonban korlátozza a használatát. A betegek vérszérumában videospecifikus antitesteket (immobilizineket) határoznak meg, amelyek komplement jelenlétében a Treponema pallidum mozdulatlanságához vezetnek. Az antigén egy élő patogén Treponema pallidum, amelyet szifilisszel fertőzött nyulakból izoláltak. Mikroszkóp segítségével megszámolják az elveszett (immobilizált) Treponema pallidum motilitást, és értékelik az RIBT eredményeit: a Treponema pallidum 51-100%-os immobilizálása pozitív; 31-50% - gyengén pozitív; 21-30% - kétséges; 0-20% - negatív.
A RIBT fontos a differenciáldiagnózisban az álpozitív szerológiai reakciók megkülönböztetése a szifilisz okozta reakcióktól. Késő pozitívvá válik, mint az RV, RIF és ezért nem használják a szifilisz fertőző formáinak diagnosztizálására, bár a szifilisz másodlagos periódusában a betegek 85-100%-ában pozitív.
A belső szervek, a mozgásszervi rendszer és az idegrendszer károsodásával járó szifilisz harmadlagos periódusában a RIBT az esetek 98-100%-ában pozitív. Az RV gyakran negatív).
Emlékeztetni kell arra, hogy a RIBT álpozitív lehet, ha a tesztszérum treponemocid gyógyszereket (penicillint, tetraciklint, makrolitokat stb.) tartalmaz, amelyek a Treponema pallidum nem specifikus immobilizálását okozzák. Ebből a célból a vért legkorábban 2 héttel az antibiotikumok és más gyógyszerek szedésének befejezése után vizsgálják RIBT-re.
A RIBT a RIF-hez hasonlóan lassan negatívvá válik a kezelés során, ezért nem használják kontrollként a kezelés során.

Immunfluoreszcens reakció (RIF)

Immunfluoreszcens reakció (RIF)- 1954-ben fejlesztette ki A. Coons, és először Deacon, Falcone, Harris használta szifilitikus fertőzés diagnosztizálására 1957-ben. A RIF a fluoreszcens antitestek meghatározásának közvetett módszerén alapul. Az előállításhoz használt antigén egy szövetpatogén Treponema pallidum, amely tárgylemezekre van rögzítve, amelyre a tesztszérumot felvisszük. Ha a tesztszérum IgM-hez és IgG-hez kapcsolódó anti-treponemális antitesteket tartalmaz, ezek erősen kötődnek az antigénhez - treponema, amelyet fluoreszcens mikroszkóppal detektálnak fajellenes ("anti-humán") fluoreszcens szérum segítségével.
RIF eredmények a készítményben a halvány treponema fényének intenzitása (sárga-zöld izzás) veszi figyelembe. Ha a szérumban nincsenek antitreponemális antitestek, a treponema pallidum nem észlelhető. Antitestek jelenlétében halvány treponema fénye észlelhető, amelynek mértéke pluszban van kifejezve: 0 és 1+ - negatív reakció; 2+-tól 4+-ig - pozitív.
A RIF csoportos treponemális reakciókra utal, és a tesztszérum (RIF-10 és RIF-200) 10- és 200-szoros hígításában adják be. A RIF-10 érzékenyebbnek tekinthető, de gyakran nem specifikus pozitív eredményeket kapnak, mint a RIF-200-nál (nagyobb a specifitása). Általában, A RIF korábban válik pozitívvá, mint az RV- pozitív primer szeronegatív szifiliszben a betegek 80%-ában, 100%-ban a szifilisz másodlagos periódusában, mindig pozitív látens szifiliszben és 95-100%-ban késői formákban és veleszületett szifiliszben.
A RIF sajátosságai növekszik a tesztszérum szorbens-ultrahangos treponemális antigénnel történő előkezelése után, amely csoportos antitesteket (RIF - abs) köt.
A RIBT és a RIF indikációi- látens szifilisz diagnosztizálása a lipidreakciók komplexumának specifitásának megerősítésére szifilitikus fertőzés gyanúja esetén, pozitív RV alapján. A pozitív RIBT és RIF a látens szifilisz bizonyítéka. Különböző betegségek (szisztémás lupus erythematosus, rosszindulatú daganatok stb.) álpozitív RV esetén, valamint ha a RIBT és RIF ismételt eredménye negatív, ez az RV nem specifikus jellegére utal. Belső szervek, mozgásszervi rendszer, idegrendszer késői szifilitikus elváltozásainak gyanúja, ha a betegek negatív RV-vel rendelkeznek. Primer szeronegatív szifilisz gyanúja, ha az erózió (fekély) felszínéről történő váladékozás ismételt vizsgálata során nem észlelhető a megnagyobbodott regionális nyirokcsomók szúrása, a treponema pallidum - ebben az esetben csak RIF-10-et adnak.
Negatív RV-s személyek vizsgálatakor akik hosszú távú szexuális és háztartási kapcsolatban voltak szifiliszben szenvedő betegekkel, figyelembe véve annak valószínű lehetőségét, hogy a közelmúltban szifiliszellenes gyógyszerekkel kezelték őket, amelyek RV-negatívumot okoztak. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA – enzimlinked immunosorbent assay) – E. Engvall és munkatársai, S. Avrames (1971) által kifejlesztett módszer. A lényeg abban áll, hogy egy szilárd fázisú hordozó felületén szorbeált szifilitikus antigént a vizsgált vérszérumból származó antitesttel kombinálnak, és egy specifikus antigén-antitest komplexet azonosítanak enzimmel jelölt fajellenes immunvérszérum segítségével. Ez lehetővé teszi az ELISA-eredmények vizuális értékelését a szubsztrát színének változásának mértéke alapján a konjugátumban lévő enzim hatására. Megbízhatatlan ELISA eredmények adódhatnak az összetevők elégtelen hígítása, a hőmérsékleti és időbeli feltételek megsértése, az oldatok pH-értékének inkonzisztenciája, a laboratóriumi üvegedények szennyeződése, valamint a közegek nem megfelelő mosási technikája miatt.

Passzív hemagglutinációs reakció (RPHA)

T. Rathlev (1965, 1967), T. Tomizawa (1966) javasolta a szifilisz diagnosztikai tesztjeként. A reakció makromodifikációját TRHA-nak, a mikromódosítást MNA-TR-nek, az automatizált változatát AMNA-TR-nek, a vörösvértestek helyett poliurea makrokapszulákkal történő reakciót MSA-TR-nek nevezzük. Az RPGA szenzitivitása és specificitása hasonló a RIBT-hez és a RIF-hez, de az RPGA kevésbé érzékeny a szifilisz korai formáiban, mint a RIF-abs, és nagyobb érzékenységgel a veleszületett szifilisz későbbi formáiban. Az RPGA minőségi és mennyiségi változatban is elérhető.

Vérvételi technika szerológiai vizsgálatokhoz

Az RV, RIF, RIBT vizsgálatához a vért az ulnaris vénából éhgyomorra vagy étkezés után legkorábban 4 órával steril fecskendővel vagy egy tűvel (gravitációval) veszik. A begyűjtés helyén a bőrt 70%-os alkohollal előkezeljük. A fecskendőt és a tűt izotóniás nátrium-klorid oldattal kell mosni. A vizsgálati vérből 5-7 ml-t tiszta, száraz, hideg kémcsőbe öntünk. A kémcsőre egy üres papírdarabot ragasztanak a páciens vezetéknevével, kezdőbetűivel, kórelőzményével vagy járóbeteg-kártyaszámával, valamint a vérvétel dátumával. Vérvétel után a kémcsövet +4°+8°C hőmérsékletű hűtőszekrénybe helyezzük másnapig. Másnap a szérumot lecsepegtetjük tesztelés céljából. Ha a vért másnap nem használják fel, a szérumot ki kell engedni a vérrögből, és legfeljebb 1 hétig hűtőszekrényben kell tárolni. A RIBT vizsgálathoz a kémcsövet speciálisan előkészítettnek és sterilnek kell lennie. A kutatási célú vérvétel szabályainak megsértése esetén a feltételek be nem tartása az eredmények torzulását vonhatja maga után.
Étkezés, alkoholfogyasztás, különféle gyógyszerek szedése, különböző oltások beadása után, nőknél a menstruációs ciklus alatt vérvétel nem javasolt.
Az expressz módszerrel végzett kutatáshoz az ujj hegyéből vettek vért, mint az ESR-re történő felvételkor, de 1 kapillárissal több vért vettek. Az expressz módszer vénapunkcióval nyert vérszérummal is elvégezhető. Ha távoli laboratóriumokban vérvizsgálatra van szükség, akkor vér helyett száraz szérum küldhető (száraz csepp módszer). Ehhez a vérvételt követő napon a szérumot elválasztják a vérrögtől, és 1 ml-es steril fecskendőbe szívják. Ezután a szérumot 2 különálló kör formájában egy 6x8 cm méretű vastag írópapír (viaszpapír vagy celofán) csíkra öntjük papír. A szérumot tartalmazó papírt védjük a közvetlen napfénytől és szobahőmérsékleten hagyjuk másnapig. A szérum kis körök formájában szárad, fényes sárgás üveges filmréteg formájában. Ezt követően a szárított szérumot tartalmazó papírcsíkokat gyógyszerporszerűen feltekerjük, és a laboratóriumba küldjük, jelezve a diagnózist és a vizsgálat célját.

Szerológiai rezisztencia

Néhány (2% vagy több) szifiliszben szenvedő betegnél a teljes antiszifilitikus terápia ellenére a negatív szerológiai reakciók lelassulnak (hiányoznak) a kezelés befejezése után akár 12 hónapig vagy tovább. Az elmúlt években gyakran megfigyelhető, úgynevezett szerológiai rezisztencia lép fel. A szerológiai rezisztenciának vannak formái:
  • Igaz(abszolút, feltétel nélküli) - további szifilitikus kezelést kell végezni, kombinálva a nem specifikus terápiával a szervezet immunrendszerének növelése érdekében.
  • Relatív- a teljes kezelés után a treponema pallidumok cisztákat vagy L-formákat képeznek, amelyek a szervezetben alacsony virulens állapotban vannak, és ennek eredményeként a kiegészítő kezelés nem változtatja meg a szerológiai reakciók, különösen a RIF és RIBT mutatóit.
Ugyanakkor a ciszta formákban kisebb anyagcsere-folyamatok mennek végbe, a cisztaformák héja idegen fehérje (antigén). A szervezet védekezése érdekében specifikus antitesteket termel, amelyek pozitívak vagy erősen pozitívak, ha szerológiai reakciókat hajtanak végre, és nincs megnyilvánulása a betegségnek. Az L-formáknál az anyagcsere folyamatok jobban lelassulnak, és az antigén tulajdonságok hiányoznak vagy enyhén kifejeződnek. Specifikus antitestek nem vagy kis mennyiségben termelődnek, a szerológiai reakciók gyengén pozitívak vagy negatívak. Minél hosszabb idő telik el a fertőzés pillanatától, annál több Treponema pallidum alakul át túlélési formákká (ciszták, spórák, L-formák, szemcsék), amelyekben a szifilitikus terápia nem hatékony.

Pszeudo-ellenállás- kezelés után a pozitív szerológiai reakciók ellenére a Treponema pallidum hiányzik a szervezetből. A szervezetben nincs antigén, de az antitestek termelése folytatódik, amelyeket a szerológiai reakciók során észlelnek.
A szerológiai rezisztencia a következők miatt alakulhat ki:

  • nem megfelelő kezelés a betegség időtartamának és stádiumának figyelembevétele nélkül;
  • elégtelen adag, és különösen a betegek testtömegének figyelmen kívül hagyása miatt;
  • a gyógyszer beadása közötti intervallum megsértése;
  • a treponema pallidum fennmaradása a szervezetben a teljes specifikus kezelés ellenére, a penicillinnel és más kemoterápiás gyógyszerekkel szembeni rezisztencia miatt a belső szervekben, az idegrendszerben, a nyirokcsomókban rejtett, antibakteriális szerekkel nem hozzáférhető elváltozások jelenlétében (treponema pallidum) gyakran megtalálhatók a hegszövetekben sok évvel a terápia befejezése után, a nyirokcsomókban néha 3-5 évvel az antiszifilitikus kezelés után is kimutatható a treponema pallidum);
  • a védőerők csökkentése különböző betegségekben és mérgezésekben (endokrinopátiák, alkoholizmus, kábítószer-függőség stb.);
  • általános kimerültség (vitaminban, fehérjében, zsírban szegény ételek fogyasztása).
Ezenkívül gyakran észlelik a szerológiai reakciók hamis pozitivitását, amely nem kapcsolódik a szifilisz jelenlétéhez a betegekben, és a következők okozzák:
  • a belső szervek egyidejű nem specifikus betegségei, a szív- és érrendszeri rendellenességek, reuma, az endokrin és idegrendszer diszfunkciói, súlyos krónikus dermatózisok, rosszindulatú daganatok;
  • az idegrendszer károsodása (súlyos sérülések, agyrázkódás, mentális trauma);
  • terhesség; krónikus mérgezés alkohollal, nikotinnal, drogokkal; fertőző betegségek (malária, tuberkulózis, vírusos hepatitis, vérhas, tífusz, tífusz és visszaeső láz).
Ezek a tényezők befolyásolhatják a szervezet immunológiai reaktivitását mind a szifilitikus megnyilvánulások aktív kifejlődésének időszakában, mind a regressziójuk során.

A szifiliszt számos tünet kíséri, és számos klinikai formája van. Felismerése a beteg átfogó klinikai és laboratóriumi vizsgálatán alapul. A szifilisz általános vérvizsgálata kevés információt ad, ezért nem használják a betegség diagnosztizálására.

Az elemzéshez a következő anyagok használhatók:

  • vér az ujjból és a vénából;
  • cerebrospinális folyadék - liquor;
  • kemény chancre váladékozása (fekélyek);
  • regionális nyirokcsomók területei.

Az anyag és a diagnosztikai módszer kiválasztása a betegség stádiumától függ. A következő részben fogunk beszélni arról, hogy milyen vizsgálatokat végeznek szifiliszre.

A betegségek laboratóriumi diagnózisának módszereinek osztályozása

A kezdeti szakaszban használhatja a bakterioszkópos módszert, amely a kórokozó - Treponema pallidum - mikroszkóp alatt történő azonosításán alapul. A jövőben széles körben alkalmazzák a mikrobiális antigének és a szervezet által biológiai anyagokban termelődő antitestek meghatározásán alapuló szerológiai vizsgálatokat.

Bakteriológiai vizsgálatokat nem végeznek, mivel a szifilisz kórokozója mesterséges körülmények között nagyon rosszul növekszik a táptalajokon.

A treponema kimutatására szolgáló összes módszer, azaz a szifilisz tesztjei két nagy csoportra oszthatók:

1. Közvetlen, amely magát a mikrobát közvetlenül észleli:

  • sötétmezős mikroszkópia (treponémák kimutatása sötét háttéren);
  • RIT teszt – nyulak fertőzése a vizsgált anyaggal;
  • polimeráz láncreakció (PCR), amely egy mikroorganizmus genetikai anyagának szakaszait detektálja.

2. Közvetett (szerológiai), a mikroba elleni antitestek kimutatásán alapul, amelyeket a szervezet fertőzésre válaszul termel.

A szerológiai tesztek két csoportra oszthatók

Nem treponemális:

  • komplementkötés reakciója kardiolipin antigénnel (CCk);
  • mikroprecipitációs reakció (MPR);
  • rapid plasma reagin (RPR) teszt;
  • teszt toluidin vörössel.

Treponemális:

  • komplementkötés reakciója treponemális antigénnel (RSCT);
  • Treponema immobilizációs reakció (RTI vagy RIBT);
  • immunfluoreszcens reakció (RIF);
  • passzív hemagglutinációs reakció (RPHA);
  • enzim immunoassay (ELISA);
  • immunoblot.

Ezeknek az elemzéseknek a módszerei meglehetősen összetettek, ezért elsősorban arra fogunk összpontosítani, hogy mikor készülnek el, és mennyire pontos információkat nyújtanak.

Mondjuk rögtön, hogy a szifilisz diagnosztizálásának alapja a szerológiai módszerek. Hogy hívják a szifilisz tesztet: a vizsgálat minden esetben más-más technikát tartalmazhat. Az alábbiakban részletesebben beszélünk róluk.

Közvetlen tesztek

Mikroszkóp alatti kimutatásuk meggyőzően bizonyítja a treponémák jelenlétét. A szifilisz valószínűsége eléri a 97%-ot. A mikrobák azonban 10 betegből csak 8-nál mutathatók ki, így a negatív teszt nem zárja ki a betegséget.

A diagnózist olyan időszakokban végzik, amikor chancre vagy bőrkiütés van. Ezeknek a fertőző elemeknek a kiürülésében keresik a betegség kórokozóit.

Hatékonyabb, ugyanakkor költségesebb és összetettebb elemzés a treponemek kimutatása fluoreszcens antitestekkel végzett előkezelés után. Ezek olyan anyagok, amelyek „ragadnak” a mikrobákhoz, és „fényt” képeznek a mikroszkóp területén.

A módszerek érzékenysége csökken a betegség hosszú időtartamával, a fekélyek és kiütések antiszeptikumokkal történő kezelésével, valamint a kezelés után is.

A RIT diagnosztizálásának biológiai módszere rendkívül specifikus, de költséges, és az eredményt csak hosszú idő után kapjuk meg, amikor a fertőzött állatban kialakult a betegség. Jelenleg a módszert gyakorlatilag nem alkalmazzák, bár gyakorlatilag ez a legpontosabb az összes közül. A szifilisz kiváló vérvizsgálata a treponémek genetikai anyagának kimutatására a PCR. Egyetlen korlátja a diagnosztika viszonylag magas költsége.

Szerológiai módszerek

Nem treponemális vizsgálatok

RSKk és RMP

E tesztek közül a leghíresebb a Wasserman-reakció. Ez a gyors diagnosztikai módszer (szifilisz expressz tesztje), amely a beteg ember véréből származó antitestek magukhoz a treponémekhez és a szarvasmarha szívéből nyert kardiolipinhez való hasonló reakcióján alapul. Az antitestek és a kardiolipin ezen kölcsönhatásának eredményeként pelyhek képződnek.

Oroszországban ezt az elemzést gyakorlatilag nem használják. Ezt a mikroprecipitációs reakció váltotta fel. A módszer hátránya az alacsony specifitás. A szifilisz álpozitív vérvizsgálata tuberkulózisban, vérbetegségekben, szisztémás lupus erythematosusban, terhesség alatt, gyermek születése után, menstruációs vérzéskor és sok más esetben fordul elő. Ezért pozitív RW esetén pontosabb diagnosztikai módszereket alkalmaznak.

A fertőzés után a reakció két hónap múlva válik pozitívvá. Másodlagos szifilisz esetén szinte minden betegnél pozitív.

A Wasserman-reakciót felváltó mikroprecipitációs reakció hasonló mechanizmussal rendelkezik. Olcsó, könnyen kivitelezhető, gyorsan értékelhető, de álpozitív eredményt is adhat. Ezt a két tesztet szűrővizsgálatként használják.

Az RMP egy hónappal a chancre megjelenése után pozitívvá válik. A végrehajtáshoz ujjból vett vért használnak.

Rossz lehet a szifilisz teszt? Természetesen igen, főleg ha nem treponemális teszteket használunk.

Az akut hamis pozitív minták okai RMP használatakor:

  • akut fertőző betegségek;
  • tüdőgyulladás;
  • miokardiális infarktus;
  • stroke;
  • sérülések és mérgezések.

A krónikus hamis pozitív eredmények gyakran a következő betegségekben fordulnak elő:

  • tuberkulózis;
  • brucellózis;
  • leptospirózis;
  • szarkoidózis;
  • reumás betegségek;
  • Fertőző mononukleózis;
  • rosszindulatú daganatok;
  • cukorbetegség;
  • májcirrózis és mások.

Ha ellentmondásos tesztek merülnek fel, treponemális szerológiai teszteket alkalmaznak a diagnózis tisztázására.

RPR és toluidin vörös teszt

A gyors plazma reagin teszt (szifilisz rpr teszt) egy másik típusú reakció a kardiolipin antigénnel. A következő esetekben használják:

  • lakossági szűrés;
  • szifilisz gyanúja;
  • donorvizsgálat.

Említsük meg a toluidinvörös tesztet is. Mindezeket a módszereket a kezelés hatékonyságának értékelésére használják. Félkvantitatívak, vagyis a gyógyulás során csökkennek, és a fertőzés visszaesésével növekednek.

A nem-treponemális tesztek negatív eredményei nagy valószínűséggel azt jelzik, hogy az alanynak nincs szifilisze. Ezért nem treponemális teszteket használnak a gyógyulás értékelésére. Az első ilyen elemzést 3 hónappal a kezelés befejezése után kell elvégezni.

Treponemális tesztek

A treponemális tesztek a treponemális antigének használatán alapulnak, ami jelentősen növeli azok diagnosztikai értékét. A következő helyzetekben használják őket:

  • pozitív szűrőteszt (mikroprecipitációs reakció);
  • hamis pozitív szűrési eredmények felismerése;
  • szifilisz gyanúja;
  • látens formák diagnosztizálása;
  • retrospektív diagnózis, ha a beteg korábban szenvedett a betegségben.

RIT és RIF

A legjobb minőségű (nagyon érzékeny és nagyon specifikus) a RIT és a RIF. Ezeknek a módszereknek a hátrányai a bonyolultság, az idő, valamint a modern berendezések és a képzett személyzet szükségessége. A legtöbb gyógyult betegnél a treponemális tesztek sok éven át pozitívak maradnak, ezért nem használhatók a gyógyulás kritériumaként.

A RIF a fertőzés után két hónappal pozitívvá válik. Ha negatív, akkor a beteg egészséges, ha pozitív, a betegség valószínűsége magas.

A RIT-t különösen gyakran alkalmazzák a hólyagrák pozitív eredményei esetén a betegség kizárására vagy megerősítésére. Nagyon érzékeny, és lehetővé teszi, hogy nagy pontossággal meg tudja állapítani, hogy a beteg szifiliszben szenved-e vagy sem. A teszt azonban csak három hónappal a fertőzés után válik pozitívvá.

Immunblot vizsgálat

Az immunoblot még érzékenyebb, mint a RIF, de kevésbé érzékeny, mint az RPGA. Ritkán alkalmazzák, főleg újszülöttek szifiliszének diagnosztizálására.

A felsorolt ​​módszerek nem alkalmasak szűrésre, vagyis a betegség gyors kimutatására, mert később válnak pozitívvá, mint a mikroprecipitációs reakció.

ELISA és RPGA

Modern, rendkívül informatív szabványosított módszerek a szifilisz diagnosztizálására - ELISA és RPGA. Olcsóak, gyorsan telepíthetők és nagy mennyiségben tesztelhetők. Ezek a tesztek a diagnózis megerősítésére használhatók.

Az RPGA analízis pozitívvá válik primer szeropozitív szifilisz esetén, vagyis a chancre megjelenésével (egy hónappal a fertőzés után). Különösen értékes a betegség késői és veleszületett formáinak diagnosztizálásában. Az RPGA-t azonban legalább egy nemtreponemális és egy treponemális teszttel kell kiegészíteni a diagnosztikai pontosság érdekében. Ez a hármas teszt a szifilisz legmegbízhatóbb tesztje. Az RPGA hátránya, hogy a pozitív reakció hosszú ideig fennmarad, ami nem teszi lehetővé, hogy a tesztet a gyógyulás kritériumaként használják.

A szifilisz ELISA-tesztje három héttel a betegség után pozitívvá válik. Az ELISA hátránya, hogy hamis lehet. Hamis pozitív reakció szisztémás betegségeknél, anyagcserezavaroknál, valamint beteg anyától született gyermekeknél fordul elő.

A szerológiai módszerek hiányosságai a legfejlettebb, hibákat nem okozó, de még mindig drágák és ritkán használt módszerek - a gázkromatográfia és tömegspektrometria - kifejlesztéséhez vezettek.

Algoritmus a szifilitikus fertőzés diagnosztizálására különböző szakaszokban

Az elsődleges szeronegatív időszakban (legfeljebb 2 hónappal a fertőzés után) a treponema keresését sötét mezőben vagy fluoreszcens antitestek segítségével végezzük.

Az elsődleges szeropozitív, másodlagos és látens szifilisz esetében RMP-t és ELISA-t, megerősítő tesztként pedig RPGA-t használnak.

A másodlagos szifilisz relapszusaiban szenvedő betegeknél a kiütés elemeit megvizsgálják, és megpróbálják elkülöníteni a treponemeket tőlük mikroszkópos vizsgálat céljából.

A harmadlagos időszakban a hólyagrák a betegek harmadában negatív. Az ELISA és RPGA pozitív, de lehet, hogy nem harmadlagos szifiliszre utalnak, hanem egy korábbi betegségre. A gyengén pozitív teszt inkább gyógyulást jelez, mint harmadlagos szifilisz.

A „veleszületett szifilisz” diagnózis felállításakor figyelembe veszik a betegség jelenlétét az anyában, az anya és a gyermek emlőrák előfordulási arányának különbségét, az újszülötteknél a pozitív ELISA-t és RPGA-t, valamint az immunblot vizsgálatot.

A terhes nőket szifiliszre ki kell vizsgálni, különösen azokat, akiknek már volt halvaszületése, ki nem alakult terhessége vagy korai vetélése volt. RMP-t, ELISA-t, RPGA-t végeznek. A terhesség megszakítása előtt megvizsgálják a betegség jelenlétét.

A szifilisz teszt elvégzésének szabályai

Ahhoz, hogy beutalót kapjon a laboratóriumba, fel kell keresnie a helyi orvosát. Ha szeretne gyorsabban kivizsgáltatni, ezt magánlaboratóriumban is megteheti beutaló nélkül (az Invitro laboratóriumok például gyorsan és névtelenül végeznek szifilisz vizsgálatot).

Hogyan kell szifiliszre kivizsgáltatni? A véradás reggel, éhgyomorra történik. Csak tiszta vizet lehet inni.

Készítmény: Két nappal a vizsgálat előtt ki kell zárnia a zsíros ételeket és különösen az alkoholt az étrendből.

Hogyan történik az elemzés? a szokásos módon ujjból vagy ulnaris vénából.

Mennyi ideig tart a szifilisz vizsgálata? A teszt eredménye általában másnapra kész. Az átirat vehető orvostól vagy laboratóriumtól.

Meddig érvényes az elemzés? Legfeljebb három hónapig.

A cerebrospinális folyadék elemzése

Egyes esetekben a neuroszifilisz diagnosztizálására cerebrospinális folyadékvizsgálatot végeznek.

Ezt a vizsgálatot minden látens szifiliszben szenvedő betegnek felírják, ha az idegrendszer patológiájának jelei vannak, valamint látens és késői neurosifiliszben.

Ezenkívül az elemzést minden betegen elvégezzük a gyógyulás után, ha pozitív szerológiai reakciókat tartanak fenn. Cikkünkben már írtunk arról, hogy ez a jelenség elég gyakran előfordul.

A szifilisz cerebrospinális folyadékanalízisét csak orvos írja elő és végezze el.

A cerebrospinális folyadékot két ágyéki csigolya közötti szúrással nyerik. Két kémcsőben 4 ml-ben gyűjtjük össze. Ezután a szúrás helyét jóddal kezeljük, és steril kötéssel fedjük le. A szúrás után a beteg legalább 3-4 órán keresztül felemelt ágyvéggel hason feküdjön, majd az oldalára tud feküdni. A szúrás utáni ágynyugalom két napig javasolt.

Az első kémcsőből származó agy-gerincvelői folyadékot általánosan elfogadott fehérjetartalomra, sejtekre, valamint az agyhártyagyulladás (agyhártyagyulladás) jeleinek meghatározására szolgáló reakciókkal vizsgálják.

A második csőből származó agy-gerincvelői folyadékban megvizsgálják a treponema elleni antitestek tartalmát a Wasserman-reakció, az RMP, a RIF és a RIBT segítségével, amelyeket fentebb tárgyaltunk.

A rendellenességek súlyossága szerint négyféle elváltozást különböztetnek meg a cerebrospinális folyadékban. Ezek elemzésével az orvos következtetéseket vonhat le az idegrendszer különböző formáinak (vascularis neurosyphilis, syphiliticus meningitis, meningovascularis szifilisz, tabes dorsalis, késői mesenchymalis neurosifilisz), valamint a pozitív szerológiai vizsgálattal rendelkező beteg gyógyulására. tesztek.

A laboratóriumi diagnosztika egyszerre több szifilisz-tesztet használ a legpontosabb eredmény elérése érdekében. Ez több időt vesz igénybe, de a legpontosabb választ adja.

A RIF elemzés eredményét leggyakrabban számokban mutatják be. A dekódolás a következő szimbólumokkal rendelkezik:

  • az erősen pozitív eredményt 4 plusz (++++) jelzi;
  • a pozitív eredményt 3 plusz (+++) jelzi;
  • gyengén pozitív eredmény, 2 plusz (++);
  • kétséges eredmény 1 plusz (+);
  • a negatív eredményt 1 mínusz (-) jelzi.

A szifilisz RIF eredményét százalékban is bemutatjuk, amely a kapcsolódó baktériumok mennyiségi mutatójától függ:

  • ha az eredmény negatív, az immobilizáció legfeljebb 20%;
  • gyengén pozitív eredménnyel az immobilizáció 20-50% között változik;
  • pozitív eredménnyel az immobilizáció 50% felett van.

Ha az eredmény az pozitív választ, akkor ez a betegség jelenlétét jelzi.

Ha az eredmény gyengén pozitív, akkor ez egyetlen mennyiségű maradék antitestet jelez a vérben.

Negatív az eredmény a treponema pallidum hiányát jelzi, ami azt jelenti, hogy a beteg egészséges.

Klinikánkon tapasztalt orvosok gyorsan és nagy pontossággal diagnosztizálják a szifiliszt. Szociálisan tehát a lakosság minden rétegére irányulunk a RIF elemzés költsége olcsó. Az ár a weboldalunkon található táblázatban található.



Kapcsolódó kiadványok