Какие показатели исследуются во время спермограммы? Как повысить подвижность спермиев

Одним из качественных показателей спермы, которую проверяют при оценке , является подвижность сперматозоидов. Малоподвижные и вялые мужские половые клетки просто не могут достигнуть яйцеклетки и погибают уже на ранних этапах. В медицинской литературе такая проблема называется . Рассмотрим ее основные причины и что можно сделать в таких ситуациях.

Причины астенозооспермии

Достоверно выявить причину снижения подвижности сперматозоидов невозможно. Выделяют ряд факторов, которые могут повлиять на мужские половые гаметы:

• инфекционно-воспалительные заболевания урогенитального тракта как острые, так и хронические;
• сахарный диабет и аутоиммунная патология;
• избыточный вес;
• возрастные изменения в половых органах;
• врожденные и приобретенные нарушения строения репродуктивной системы;
• травмы половых органов;
• действие высоких температур;
• варикоцеле;
• несбалансированное питание;
• вредные привычки и образ жизни мужчины.

Важно! Подвижность сперматозоидов прогрессивно снижается при длительном половом воздержании.

Существует много факторов, по которым сперматозоиды становятся медленные и вялые. В некоторых случаях узнать точную причину не представляется возможным и у пациента диагностируют идиопатическую (по неясной причине) астенозооспермию.

Одним из факторов снижения подвижности сперматозоидов может стать вредная производственная среда.

Как классифицируют эту болезнь

Выделяют несколько степеней астенозооспермии. В зависимости от этой степени выбирают тактику лечения, препараты или рекомендуют сразу воспользоваться достижениями вспомогательной репродукции:

1. Первая степень . Количество активных сперматозоидов класса А и В больше 40 %. В этой ситуации мужчине предлагают скорректировать диету, отказаться от вредных привычек и рекомендуют прием натуральных ряда лекарственных препаратов.
2. Вторая . Количество активных сперматозоидов около 30-39%.
3. Третья . Их число меньше 30%. В этих случаях пациенту может быть порекомендовано воспользоваться вспомогательной технологией зачатия, поскольку шансы на естественную беременность очень низкие.

Как проверить подвижность мужских половых клеток

Снижение подвижности сперматозоидов можно узнать, выполнив спермограмму. Это самое простое исследование, которое позволяет оценить качественные характеристики спермы, в том числе и подвижность сперматозоидов.

Выделяют четыре класса подвижности мужских половых гамет:

• A – активно подвижные клетки;
• B – медленно прогрессивно подвижные;
• C – неправильно двигающиеся, малоподвижные;
• D – неподвижные.

Оплодотворить яйцеклетку могут только сперматозоиды первых двух классов. В норме их количество должно быть больше 50% от общего числа всех половых гамет.

Важно! Низкая подвижность сперматозоидов – это не повод сразу принимать лекарства и пытаться ее улучшить. Перед лечением анализ повторяют несколько раз, чтобы удостовериться что проблема имеет место быть.

Как увеличить подвижность сперматозоидов?

Вопрос о том, как повысить подвижность сперматозоидов, очень важен для пар, страдающих мужским бесплодием. Чтобы улучшить спермограмму лечение должно проходить в нескольких направлениях:

1. Изменение образа жизни, сбалансированное питание, отказ от вредных привычек и регулярный секс.
2. Терапия инфекционно-воспалительных болезней репродуктивных органов;
3. Хирургическое лечение аномалий строения и стриктур семявыносящих протоков.
4. Прием фармакологически безопасных и эффективных лекарственных средств.
5. Массаж простаты с целью улучшения кровоснабжения этой области;
6. Физиолечение.

Рассмотрим препараты, которые активно используются для улучшения качества спермы и подвижности мужских половых гамет:

1. Спермактин. Пищевая добавка, которая содержит фруктозу, карнитин и лимонную кислоту. Улучшает качественные и количественные показатели спермы. Его применяют в комплексном лечении мужского бесплодия, рекомендуют при астенозооспермии, а также на этапе подготовки к ЭКО и донорству спермы. Средняя стоимость – 2500-3000 руб. Курс лечения от 3 месяцев.
2. Профертил. В составе карнитин, аргинин, цинк, витамин Е и фолиевая кислота. Этот препарат тоже биоактивная добавка к пище. Рекомендуют принимать в схеме лечения идиопатического мужского бесплодия, при снижении качества спермы и при других нарушениях репродуктивной функции у мужчины. Курс лечения от месяца. Стоимость в пределах 8500 руб. за 180 капсул.
3. Спеман. Комбинированный растительный препарат на основе целебных трав (ятрышник, латук, бобы, аргирея и др.). Рекомендуют при воспалительных болезнях простаты и ухудшении активности спермиев. Стоимость около 300 руб. за 100 таблеток. Курс приема в течение полугода.

При недостатке тестостерона мужчине могут быть назначены гормональные препараты. Кроме этого, хороший эффект дает прием комплексных витаминов и антиоксидантов.

Из народных способов лечения астенозооспермии эффективными считается перга (продукт пчеловодства), женьшень, чеснок, грецкие орехи и устрицы.

Анализ на спермограмму служит одним из самых достоверных способов исследования фертильности мужчины. Он позволяет раскрыть многие характеристики эякулята и выявить причины наблюдаемых отклонений. Подвижность сперматозоидов в спермограмме является важным показателем, который говорит о возможности процесса зачатия.

Группы сперматозоидов по подвижности

Оценка подвижности сперматозоидов происходит с помощью микроскопа. Лаборант помещает каплю спермы на предметное стекло и рассматривает ее при увеличении, подсчитывая количество сперматозоидов с разными характеристиками. Для большей точности анализа может использоваться счетная камера. Все обнаруженные сперматозоиды подразделяются на четыре группы:

• А – половые клетки с быстрым прямолинейным движением;
• В - половые клетки, проявляющие замедленное, но равномерное поступательное движение;
• С – сперматозоиды с нарушением движения, они могут перемещаться по спирали или по кругу, зигзагообразно и иначе;
• D – сперматозоиды, которые совсем не двигаются.

Наиболее важными являются сперматозоиды первой и второй групп, поэтому первоначально определяют в спермограмме прогрессивно подвижные клетки, уже затем подсчитываются спермии групп С и D. При этом оценивается и продолжительность сохранения подвижности. Полученные результаты сравниваются с нормативами того, какая должна быть подвижность спермограммы.

Норма подвижности спермограммы наблюдается, когда массовая доля сперматозоидов типа А составляет более 25 процентов, а сумма клеток А и В – более половины от общего числа. При этом более 20 процентов должны сохранять свою подвижность.

Причины снижения подвижности

Общая подвижность в спермограмме может быть:

• хорошая, если показатель соответствует норме;
• слабовыраженная, когда процент прогрессивной подвижности в спермограмме меньше 50 процентов;
• умеренная, процент опускается до 40;
• выраженная, соответствующая 30 процентам подвижных сперматозоидов.

Снижение подвижности может происходить по нескольким причинам, которые можно разделить на две группы: внешние и внутренние.

Внешние включают:

• Неблагоприятную экологическую обстановку;
• Вредные привычки, такие как курение или злоупотребление алкоголем;
• Перегревание органов малого таза;
• Отравление токсическими веществами;
• Травмы;
• Воздействие электромагнитного излучения.

К внутренним относят:

• Наличие генетических аномалий;
• Воспалительные и хронические заболевания;
• Нарушения в гормональной сфере;
• Сбой в иммунной системе организма.

Лечение низкой подвижности сперматозоидов

Ответить на вопрос: как улучшить подвижность спермограммы? Должен врач, он предлагает терапию, включающую в себя целый комплекс методов и средств.

Первое средство, как увеличить подвижность спермограммы, это правильное питание. При плохих результатах необходимо пересмотреть свой рацион и убрать из него некоторые продукты:

• Жирную и калорийную пищу;
• Фастфуд и полуфабрикаты;
• Консервированные и соленые продукты;
• Кофе, крепкий чай, газированные напитки.

Вместо них в питание нужно включить:

• Молоко и кисломолочные продукты;
• Рыбу и морепродукты;
• Орехи, семечки;
• Овощи, фрукты и зелень;
• Мед и продукты пчеловодства.

Они содержат большое количество полезных веществ, необходимых мужскому организму для нормального формирования половых клеток. Правильное питание позволяет добиться того, что увеличится прогрессивная подвижность в спермограмме и улучшится состояние сперматозоидов. Дополнительно можно включить прием витаминов и минералов, желательно специальных комплексов, разработанных для мужчин. Они содержат дополнительные компоненты, которые расходуются в большей степени при выработке сперматозоидов.

Обязательными условием лечения является физическая нагрузка. Занятия спортом помогают улучшить кровообращение, то способствует нормализации процесса сперматогенеза. Только нагрузка должна быть дозированной без излишеств.

Отказ от курения и приема алкоголя также положительно влияет на подвижность сперматозоидов. Уже через две недели показатели значительно улучшаются.

При наличии негативного воздействия, такого как токсические вещества или электромагнитное излучение, их нужно устранить, тогда и результаты изменятся в лучшую сторону. Важно также вылечить общие заболевания, которыми страдает пациент, поскольку они косвенно, а иногда и напрямую, влияют на состояние половых клеток.

Основной целью исследования эякулята является определение способности спермы к оплодотворению и выявление заболеваний и/или патологических процессов, вызвавших соответствующие поражения. Исследование спермы – неотъемлемая часть диагностики бесплодия. Примерно в 47% случаев причиной бездетности семейных пар является мужчина. Причиной бесплодия мужчин могут быть заболевания яичек, простаты, нарушения проводимости семявыводящих путей, заболевания и пороки развития уретры. Исследование семенной жидкости также является одним из тестов при диагностике гормональных расстройств, заболеваний половых органов или пороков их развития.

В норме эякулят представляет собой взвесь сперматозоидов в секрете яичек и их придатков, которая к моменту эякуляции смешивается с секретом предстательной железы, семенных пузырьков и луковично-уретральных желез.

Сперматозоиды составляют около 5% объема спермы, они образуются в семенниках. Приблизительно 60% объема спермы образуется в семенных пузырьках. Это вязкая, нейтральная или слегка щелочная жидкость, часто желтая или даже сильно пигментированная из-за высокого содержания рибофлавина.

Простата производит примерно 20% объема семенной жидкости. Эта жидкость, похожая на молоко, имеет слабокислую реакцию (рН около 6,5), в основном из-за высокого содержания лимонной кислоты. Простатический секрет также богат кислой фосфатазой и протеолитическими ферментами, считается, что протеолитические ферменты отвечают за коагуляцию и разжижение семенной жидкости.

Менее 10–15% объема спермы образуется в придатках яичек, семявыводящих протоках, бульбоуретральных и уретральных железах.

Стандартная спермограмма оценивает физические (макроскопические) и микроскопические параметры эякулята (Табл., рис. 1-3).

Условия взятия и хранения образца

Эякулят должен быть получен после, как минимум, 48 ч, но не более 7 дней полового воздержания.

Эякулят, полученный путем мастурбации, необходимо собрать полностью и держать в тепле (20–40 оС). Образец стабилен один час, однако в случае, если подвижность сперматозоидов патологически низкая (менее 25% сперматозоидов с быстрым линейным поступательным движением), срок между получением и анализом образца следует свести к минимуму.

Метод исследования

Макроскопическое исследование – определение консистенции, объема, запаха, цвета, вязкости и рН эякулята.

Сперма, полученная при эякуляции, густая и вязкая, что обусловлено свертыванием секрета семенных пузырьков. В норме при комнатной температуре образец эякулята должен разжижаться в течение 60 мин. Если эякулят длительное время остается вязким, полувязким или вообще не разжижается, то можно предполагать воспаление предстательной железы. В норме объем эякулята составляет 2–6 мл. Количество менее 1,0 мл характерно для андрогенной недостаточности, эндокринных заболеваний, сужения и деформации пузырьков, семявыводящих путей. Максимальный объем может достигать 15 мл. Объем эякулята не влияет на фертильность. Запах нормального эякулята специфический и обусловлен спермином (напоминает запах «свежих каштанов»). Специфический запах становится слабым или отсутствует при закупорке выводных протоков предстательной железы. При гнойно-воспалительных процессах запах спермы обусловлен продуктами жизнедеятельности бактерий, вызвавших воспалительный процесс.

Микроскопическое исследование – изучение в нативном препарате подвижности сперматозоидов и наличия агглютинации, подсчет количества сперматозоидов в камере Горяева, изучение морфологии сперматозоидов, клеток сперматогенеза и дифференциальная диагностика живых и мертвых сперматозоидов в окрашенных препаратах.

Микроскопическое исследование эякулята проводят после полного его разжижения

Подвижность каждого сперматозоида классифицируют по категориям, используя следующие критерии:

а) быстрое поступательное движение;

b) медленное и вялопоступательное движение;

c) непоступательное движение;

d) неподвижные сперматозоиды.

Сначала подсчитывают все сперматозоиды категорий а и b в ограниченном участке поля зрения или, если концентрация сперматозоидов низкая, во всем поле зрения (%). Далее в той же области подсчитывают сперматозоиды с непоступательным движением (категория с) (%) и неподвижные сперматозоиды (категория d) (%).

Определять подвижность можно с подсчетом в камере Горяева. Сперму разводят в 20 раз физиологическим раствором, в камере смотрят только неподвижные и малоподвижные сперматозоиды.

Расчет ведут по формуле:

Х = А – (В + С), где,

А – общее количество сперматозоидов;

В – количество малоподвижных сперматозоидов;

С – количество неподвижных сперматозоидов.

Отсюда количество активно подвижных сперматозоидов в процентах составляет (Y):

Y = Х * 100/А.

Подвижность сперматозоидов зависит от времени года и суток. Имеются данные, что весной происходит снижение подвижности сперматозоидов (сезонные колебания). При наблюдении за количеством активно-подвижных сперматозоидов в течение суток было отмечено увеличение их количества во второй половине дня (суточные ритмы).

Снижение подвижности сперматозоидов ниже нормы – астенозооспермия. Незначительной степени астенозооспермии – количество активно- и малоподвижных сперматозоидов c поступательным движением в сумме составляет менее 50%, но более 30%.

Оценка агглютинации сперматозоидов. Под агглютинацией сперматозоидов подразумевают склеивание подвижных сперматозоидов между собой головками, хвостами или головок с хвостами. Склеивание неподвижных сперматозоидов друг с другом или подвижных сперматозоидов с нитями слизи, другими клетками или остатками клеток следует считать и регистрировать не как агглютинацию, а как неспецифическую агрегацию. При исследовании регистрируют тип агглютинации (головками, хвостами, смешанный вариант). Можно использовать полуколичественный метод оценки степени агглютинации от «–» (отсутствие агглютинации) до «+++» (тяжелая степень, при которой все подвижные сперматозоиды подвержены агглютинации). В норме склеиваются не более 3–5%. Если количество агглютинированных сперматозоидов составляет 10–15%, можно говорить о понижении их оплодотворяющей способности.

Подсчет общего количества сперматозоидов проводят в камере Горяева. Общее количество сперматозоидов в эякуляте рассчитывают, умножая количество сперматозоидов в 1мл спермы на объем выделенной спермы.

Нормоспермия – у здорового мужчины в 1 мл эякулята содержится более 20 млн. сперматозоидов.

Полизооспермия – количество сперматозоидов в 1 мл эякулята превышает 150 млн.

Олигозооспермия – в 1 мл эякулята содержится менее 20 млн. сперматозоидов.

Азооспермия – отсутствие сперматозоидов в эякуляте.

Аспермия – в доставленной жидкости нет сперматозоидов и клеток сперматогенеза.

Оценка жизнеспособности сперматозоидов. Для оценки жизнеспособности сперматозоидов смешивают на предметном стекле одну каплю свежего эякулята с каплей стандартного красителя эозина. Живые сперматозоиды в таких препаратах не окрашиваются (белые); мертвые сперматозоиды окрашиваются в красный цвет, т.к. повреждены их плазматические мембраны. Под жизнеспособностью подразумевают долю (в процентах) «живых» сперматозоидов. Жизнеспособность следует оценивать, если процент неподвижных сперматозоидов превышает 50%.

Оценка жизнеспособности может служить контролем точности оценки подвижности сперматозоидов, поскольку процент мертвых клеток не должен превышать (с учетом ошибки подсчета) процента неподвижных сперматозоидов. Наличие большого количества живых, но неподвижных сперматозоидов, может указывать на структурные дефекты жгутиков. Сумма мертвых и живых сперматозоидов не должна превышать 100%.

Характеристика клеточных элементов эякулята. Обычно эякулят содержит не только сперматозоиды, но и другие клетки, которые в совокупности обозначают, как «круглые клетки». К их числу относят эпителиальные клетки мочеиспускательного канала, клетки предстательной железы, незрелые половые клетки и лейкоциты. В норме эякулят не должен содержать более 5*106 круглых клеток/мл.

В большинстве случаев эякулят человека содержит лейкоциты, в основном нейтрофилы. Повышенное содержание этих клеток (лейкоспермия) может свидетельствовать о наличии инфекции и о плохом качестве сперматозоидов. Число лейкоцитов не должно превышать 1106/мл. Подсчет ведут в камере Горяева аналогично подсчету сперматозоидов.

Эякулят кроме лейкоцитов может содержать незрелые половые клетки (клетки сперматогенеза) на разных стадиях созревания: сперматогоний, сперматоцит I порядка, сперматоцит II порядка, сперматид. (рис. 2)

Наличие в эякуляте различных типов незрелых клеток сперматогенеза обычно говорит о его нарушении. Избыток этих клеток является следствием нарушения функции семенных канальцев, в частности, при сниженном сперматогенезе, варикоцеле и патологии клеток Сертоли.

Оценка морфологии сперматозоидов. Для анализа используют мазок, окрашенный гистологическими красителями (гематоксилин, Романовский-Гимза и др.), в котором производят последовательный подсчет 200 сперматозоидов (однократный подсчет 200 сперматозоидов предпочтительней двукратного подсчета 100 сперматозоидов) и выражают в процентах количество нормальных и патологических форм (Рис. 3).

Головка сперматозоида должна быть овальной формы. Отношение длины головки к ее ширине должно составлять от 1,5 до 1,75. Должна быть видна хорошо очерченная акросомная область, составляющая 40–70% площади головки. Шейка сперматозоида должна быть тонкой, составлять 1,5 длины головки сперматозоида и прикрепляться к головке вдоль ее оси. Размеры цитоплазматических капель не должны превышать 1/2 размера головки нормального сперматозоида. Хвост должен быть прямым, одинаковой толщины на всем протяжении и несколько уже в средней части, не закрученным и иметь длину около 45 мкм. Отношение длины головки к длине хвоста у нормальных сперматозоидов 1:9 или 1:10.

Дефекты головки: большие, маленькие, конические, грушевидные, круглые, аморфные, с вакуолями в области хроматина; головки с маленькой акросомальной областью, вакуолизированной акросомой, с несимметрично расположенной акросомой; двойные и множественные головки, головки с компактным строением хроматина и т.д.

Дефекты шейки и средней части: «склоненная» шейка (шейка и хвост образуют угол 90° к длинной оси головки), асимметричное прикрепление средней части к головке, утолщенная или неравномерная средняя часть, патологически тонкая средняя часть (отсутствие митохондриальной оболочки) и их любая комбинация.

Дефекты хвоста: хвосты короткие, множественные, в виде шпильки, сломанные, наклонные (угол больше 90°), неравномерная толщина хвоста, тонкая средняя часть, закрученный конец, закрученный полностью и их любая комбинация. При дифференцированном морфологическом подсчете учитываются только сперматозоиды с хвостами.

Тератозооспермия – увеличение количества патологических форм сперматозоидов выше референсных значений. Выраженная тератозооспермия резко снижает шансы оплодотворения и увеличивает вероятность пороков развития у плода, если оплодотворение произошло. Тератозооспермия обычно сочетается с олигозооспермией и астенозооспермией.

Сперматозоиды, у которых головка заключена в цитоплазматическую каплю, и те, у которых цитоплазматическая капля расположена на шейке в виде шарфа и по отношению к размеру головки составляет более 1/3, выделяются как незрелые или юные. В нормальной спермограмме они составляют около 1%.

Референтные интервалы

• Объем – 2,0 мл или более;
• рН – 7,2 или более;
• концентрация – 20 *106 сперматозоидов/мл или более;
• общее количество – 40 *106 сперматозоидов и более в эякуляте;
• подвижность – 50% или более подвижных (категория а+b); 25% или более с поступательным движением (категория а) в течение 60 мин после эякуляции;
• жизнеспособность – 50% или более живых, т.е. не окрашенных;
• лейкоциты – менее 1 *106/мл.

Классификация показателей эякулята

• Нормозооспермия – нормальный эякулят;
• олигозооспермия – концентрация сперматозоидов ниже нормативных значений;
• астенозооспермия – подвижность ниже нормативных значений;
• тератозооспермия – морфология ниже нормативных значений;
• олигоастенотератозооспермия – наличие нарушений всех трех показателей;
• азооспермия – нет сперматозоидов в эякуляте;
• аспермия – нет эякулята.

Cпермограмма или анализ спермы – один из основных методов диагностики способности зачатия при обследовании мужчины в случае бесплодия.

В 2010 году всемирная организация здравоохранения издала «Пособие по лабораторному исследованию человеческой спермы» («WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen »). В данном руководстве рассмотрены все этапы анализы спермы – от техники получения до утилизации.

Синонимы: анализ спермы, анализ эякулята, спермиог рамма, спермато грамма, анализ семени, сперматологическое исследование.

Спермограмма (анализ спермы) это

стандартизированный метод исследования эякулята, нацеленный на оценку макроскопических и микроскопических параметров спермы.

Термин «анализ спермы» довольно широк, включает в себя несколько видов исследования (согласно определению ВОЗ), а «спермограмма» нацелена в первую очередь на оценку количества и качества сперматозоидов. В отечественной урологии и андрологии данные термины используют как синонимы.

Что такое сперма и эякулят?

Сперма – концентрированная суспензия сперматозоидов, выделяется во время эякуляции.

Эякулят – жидкость, вытекающая из мужского пениса во время оргазма, состоит из сперматозоидов и секрета простаты и семенных пузырьков. Термины «эякулят» и «сперма» – синонимы.

Сперма на 90% состоит из воды, 6% органических веществ и 4% .

Состав спермы

1. семенная плазма – смесь из жидкостей, вырабатываемых яичками, клетками семявыносящих канальцев, протоков придатка яичка, семявыносящих протоков, семенных пузырьков, простаты, бульбоуретральных желез и парауретральных желез в самой уретре;
2. форменные элементы, среди которых первое место занимают зрелые сперматозоиды, количество у взрослого мужчины около 15-100 миллионов в 1 мл эякулята; в сперме могут быть выявлены другие виды клеток, но их общее число не должно превышать 2% от общего числа клеток

• круглые дегенеративные клетки из герминативного эпителия или из выстилки прямых канальцев и сети яичка
• цилиндрический эпителий из выводных половых протоков и уретры
• лейкоциты
• фрагменты цитоплазмы сперматид (остаточные тельца)
• простатические камни
• липидные зерна
• белковые гранулы
• пигментные зерна
• кристаллы Бетхера — призматические кристаллы, осадок солей фосфорной кислоты и спермина, появляются при испарении воды из спермы

Подготовка

• половое воздержание (в т.ч. и от мастурбации) 2-7 дней; при последующих исследованиях срок воздержания должен быть одинаковым – если при первом исследовании было 4 дня, то и при втором и т.д. — аналогично 4 дня
• исключить влияние температуры – сауна, баня, горячая ванная или душ
• не употреблять алкоголь за 14 дней до исследования
• исключить прием препаратов, оказывающих влияние на урогенитальный тракт

• сдавать сперму для нужно в специальной комнате при лаборатории (клинике) для минимизации времени между получением материала и его исследованием
• метод получения спермы – мастурбация в химически чистый, широкогорлый стеклянный или пластиковый стаканчик (можно приобрести в аптеке или в самой лаборатории)
• в некоторых случаях можно использовать специальные презервативы без спермицидов
• собрать нужно всю сперму, самой ценной считается именно первая капля в которой содержится максимум спермиев (ее потеря может привести к ложным результатам теста)
• посуда для спермы должна быть стерильной, если будет производится бактериологический посев спермы, внутриматочная инсеминация или оплодотворение в пробирке (IVF, in vitro fertilisation )
• температура посуды 20-40°С (т.е. нельзя прийти с мороза и начать сдавать пробу)
• в исключительных случаях собрать сперму можно в домашних условиях, но время транспорта ее в лабораторию должно быть менее 60 минут в светонепроницаемом пакете, температура 20-40°С

Запрещено:

• сперма, полученная при прерванном половом акте, не подходит для анализа, поскольку велик риск потери первой капли, расшифровать, полученный таким образом, анализ спермы невозможно
• обыкновенные презервативы нельзя применять для сбора спермы, поскольку латекс оказывает спермицидное действие (разрушает сперматозоиды)

В процессе анализа спермы существует четыре важных пункта – подготовка к анализу, транспортировка в лабораторию, выполнение самого анализа, расшифровка. От мужчины зависят только первые два.

Сперматозоид

Для врача, оценивающего качество спермы, наиболее важны два параметра:

• общее количество сперматозоидов – способность яичек вырабатывать сперматозоиды и транспортной системы их выделить
• общий объем эякулята – способность желез выделить секрет, обеспечивающий жизнеспособность сперматозоидов

Плохая спермограмма

Мужчины с результатами спермограммы, которые выходят за пределы нормы имеют меньшую вероятность зачатия естественным путем, но это ни в коем случае не значит, что мужчина не может стать отцом.

Расшифровка

1. Цвет спермы и время разжижения

Нормальная сперма имеет бело-серый цвет, слегка опалесцирует, однородна, при комнатной температуре разжижается за 15 минут. Если время разжижения более 60 минут – добавляют специальные ферменты для растворения, чтоб сделать ее пригодной для дальнейшего исследования. В сперме не должно быть примесей свежей крови, коричневого гематина (указывает не предыдущее кровотечение), видимого гноя и волокон слизи. Желтая окраска эякулята бывает при приеме поливитаминов, антибиотиков, желтухе. Могут присутствовать гелевые зерна, которые не растворяются при разжижении.

2. Объем

Минимальное количество спермы, необходимое для исследования – 1 мл, норма для оплодотворения – 1,5-5 мл. Количество спермы зависит от объема семенной плазмы и не зависит от числа сперматозоидов.

3. Консистенция и вязкость

Оценивается после разжижения по длине волокна, образованного при касании стеклянной палочкой к сперме. Повышенная вязкость спермы оказывает прямое влияние на подвижность сперматозоидов и непрямо свидетельствует о наличии антиспермальных антител.

4. Кислотность или pH

pH спермы слабощелочная, от 7,2 до 7,8. pH выше 7,8 свидетельствует о наличии инфекции, а при обструкции семявыносящего пути или врожденном отсутствии семявыносящего протока развивается азооспермия (полное отсутствие сперматозоидов) и кислотность ниже 7,0.

Микроскопическое исследование спермы

Микроскопическое исследование спермы проводится под специальным микроскопом с фазовым контрастом или обыкновенным световым микроскопом, просматриваются неокрашенный и окрашенные мазки.

1. Количество сперматозоидов

Врач подсчитывает число сперматозоидов в специальной счетной камере (гемоцитометре) под микроскопом и рассчитывает их общее количество в пробе и в 1 мл. В норме общее число сперматозоидов в пробе должно быть не менее 15 *10 6 /мл, а в целой пробе – более 39 *10 6 /мл

Если в сперме спермиев очень мало (олигоспермия), то дополнительно пробу центрифугируют и исследуют только осадок (криптозооспермия). Если же и в осадке спермы не выявлено ни одного сперматозоида, то в заключении будет написано – «азооспермия».

2. Подвижность сперматозоидов

Для исследования подвижности сперматозоидов врач дважды просматривает 5 полей зрения в микроскопе и оценивает не менее 200 сперматозоидов.

Критерии подвижности сперматозоидов:

a) быстрое прогрессивное движение (PR) – 25 микрон/сек или более при t 37°С или 20 микрон/сек или более при t 20°С; 25 микрон – это 5 размеров головок сперматозоида или половина жгутика, так продвигаются более 32% сперматозоидов

b) медленное прогрессивное движение («sluggish » – как улитка)

c) непрогрессивное движение (NP) – менее 5 микрон/сек

d) неподвижный сперматозоид (IM)

Общая подвижность – это сумма категорий a, b, c в норме более 40%.

Прогрессивно подвижные сперматозоиды – сумма категорий a и b должна быть не менее 32%.

При текущем инфекционном заболевании урогенитального тракта – простатите, уретрите, везикулите или наличии сперматических антител скорость движения сперматозоидов снижается.

3. Другие клеточные элементы в сперме

В эякуляте, кроме сперматозоидов, могут присутствовать и другие клетки, которые объединяют термином «круглые клетки», поскольку увеличение микроскопа не всегда позволяет их дифференцировать. Для их идентификации проводятся окрашивание препаратов специальными красителями.

«Круглыми клетками» являются:

• эпителиальные клетки из урогенитального тракта
• простатические клетки
• сперматогенные клетки
• лейкоциты

Нормальный эякулят должен содержать менее 5 миллионов круглых клеток в 1 миллилитре.

Лейкоциты, преимущественно , в незначительном числе присутствуют и в здоровом эякуляте, а вот их повышенное количество – лейкоцитоспермия – может быть вызвана инфекцией и воспалением.

При выявлении повышенного количества лейкоцитов в сперме нужно провести дополнительные исследования – бак. посев мочи, бак. посев секрета простаты, бакт. посев урогенитальных выделений. Отсутствие лейкоцитов в сперме не исключает наличие мочеполовой инфекции.

Присутствие в сперме незрелых зародышевых клеток (сперматиды, сперматоциты, сперматогонии) и эпителиальных клеток – показатель нарушенного созревания сперматозоидов, их замедленного созревания (гипоспермиогенез), варикоцеле, дисфункции клеток Сертоли, связано с низкой вероятностью успешного оплодотворения в пробирке (IVF).

4. Агглютинация сперматозоидов

Агглютинация или склеивание живых сперматозоидов между собой головками, шейками, жгутиками или смешанно (головка+жгутик, шейка+головка и т.д.) приводит к их обездвиживанию, это непрямой показатель иммунологического бесплодия. В норме агглютинация сперматозоидов отсутствует.

Для диагностики иммунного бесплодия проводится MAR-тест и immunobead-тест.

5. % живых сперматозоидов

Жизнеспособность сперматозоидов исследуют «прижизненной» окраской, показатель исследуют, если число неподвижных спермиев превышает 50%. Мертвые сперматозоиды, с разрушенной клеточной мембраной, не окрашиваются. Тест позволяет оценить число живых, но неподвижных спермиев от мертвых. Большое число живых, но неподвижных спермиев указывает на структурные дефекты жгутиков.

Значительное количество мертвых сперматозоидов (некроспермия) указывает на заболевание именно яичек.

Нижняя граница нормы % жизнеспособных сперматозоидов 58%.

6. Строение сперматозоидов

Строение сперматозода очень вариабельно и не считается обязательным исследованием в рамках стандартной спермограммы, но обязательно при планировании ЭКО. Форма сперматозоида косвенно отображает способность к зачатию и определяет эффективность ЭКО. При низком числе морфологически нормальных спермиев рекомендовано ИКСИ (ICSI - IntraCytoplasmic Sperm Injection , введение сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки, интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида).

Врач обмеряет 200 сперматозоидов с сравнивает с «идеальным» сперматозоидом (читай выше в разделе о строении сперматозоида). Критерии «правильности» (Крюгера-Менквельда) очень строги, поэтому и нормы довольно низкие. В мазке должно быть не менее 14% анатомически образцовых сперматозоидов, чтоб сперма считалась фертильной (способной оплодотворить). Показатель 5-14% имеет хороший прогноз зачатия, а 0-4 – прогноз плохой, данная сперма субфертильна.

Сперматозоид считается нормальным / типичным если головка, шейка и жгутик не имеют ни одного отклонения от нормы, ни одной аномалии.

В эякуляте находится большое число сперматозоидов с различными морфологически комбинированными деформациями, например, сочетание измененной акросомы и круглой головки (). Поэтому врачи пользуются специальными индексами:

• TZI (teratozoospermia index) – индекс тератоспермии — среднее количество дефектов на 1 аномальный сперматозоид, в норме до 1,6
• MAI (multiple anomalies index) – индекс множественных аномалий – сумма всех дефектов в общем количестве аномальных спермиев
• SDI (sperm deformity index) – индекс дефектности сперматозоидов – сумма дефектов в общем числе всех подсчитанных сперматозоидов

Повышенный процент аномальных сперматозоидов вызван заболеваниями яичек и нарушенным спермогенезом.

Заключение врача, исследовавшего сперму

• нормозооспермия – нормальный (полностью «здоровый») эякулят, согласно написанным выше параметрам
• олигозооспермия – общее число сперматозоидов менее 20*10 6 /мл
• астенозооспермия – менее 50% спермиев с прогрессивными движениями категорий А и Б, или менее 25% с подвижностью А
• теротозооспермия – менее 15% сперматозоидов с нормальным строением
• олигоастенотератоспермия – комбинация всех трех описанных выше состояний
• олигоастенозооспермия – наиболее частая комбинация нарушений в сперме – снижение подвижности и количества сперматозоидов
• криптозооспермия – сперматозоиды выявляют только после центрифугирования – осаждения сперматозоидов
• некрозооспермия – живые сперматозоиды в препарате отсутствуют
• пиоспермия – повышенное число лейкоцитов в эякуляте
• азооспермия/аспермия – в образце эякулята отсутствуют сперматозоиды

Вопросы врачу

1. От чего зависит качество спермы?

Качество спермы зависит от состояния всех органов, принимающих участие в ее образовании и выведении, а также организма в целом. Нельзя ожидать нормального результата спермограммы при наличии тяжелых, хронических заболеваний или депрессии.

2. Как улучшить спермограмму?

Здоровый образ жизни (питание, работа, сон, отдых), своевременное полное лечение всех заболеваний и половая грамотность.

3. Выявляет ли спермограмма инфекции с половым путем передачи?

Нет. Только повышенное число лейкоцитов может косвенно указать на воспаление, но сам возбудитель спермограмма не выявит.

4. Нужно ли делать спермограмму профилактически, например, в определенном возрасте или раннего выявления заболевания?

5. Если спермограмма в норме, то больше мужчине обследоваться не нужно?

Нет, нормальный результат исследования спермы – первый шаг в диагностике заболевания. Нормальный результат анализа спермы не исключает наличие заболевания.

6. У меня нет проблем с эрекцией, значит спермограмму проводить не нужно?

Нет, связи между эрекцией и спермограммой нет. При нормальной эректильной функции сперма может быть «плохой» и наоборот.

Эрекция – это увеличение объема и затвердение полового члена при сексуальном возбуждении для осуществления полового акта.

7. Может для достоверности результата анализ спермы стоит проводить в разных лабораториях?

Нет. Анализ спермы нужно проводить в одной и той же лаборатории, поскольку в правильность результата большой вклад вносит профессионализм врача выполняющего исследование.

8. При каких параметрах спермограммы гарантировано зачатие?

Зачатие – сложный процесс слияния мужской и женской половых клеток – сперматозоида и яйцеклетки. При природном половом акте никто не сможет гарантировать успешность зачатия даже при идеальных результатах анализа спермы. Аналогично и при «плохой спермограмме» спонтанное зачатие возможно.

Факты

• спермограмма – это не анализ на бесплодие
• нормы и референсные пределы исследования спермы у каждой лаборатории «свои», поэтому не стоит удивляться увидев в один раз норму 2-6 а другой 0-8
• норма в результатах спермограммы довольно условна и субъективна, ведь анализ проводит человек; благодаря тому, что отдельные анализы в рамках спермограммы проводятся дважды, подобное искажение нивелируют
• расшифровывать спермограмму нужно комплексно, незначительное отклонение не всегда свидетельствует о наличии болезни
• автоматические анализаторы имеют лишь вспомогательную роль в исследовании спермы
• чтоб полученные результаты спермограммы можно было сравнивать между собой, необходимо проводить сбор спермы в одних и тех же условиях, одной и той же методикой, при одинаковом времени воздержания; оптимально, чтоб результаты расшифровывал один и тот же специалист

Спермограмма — анализ спермы, расшифровка, результаты was last modified: Октябрь 29th, 2017 by Мария Бодян

Спермограмма

Спермограмма - анализ эякулята(спермы), используемый для установления фертильности мужчины.
Исследуемые характеристики при анализе эякулята
Составные части спермограммы:

• макроскопические параметры эякулята: объем спермы, цвет, время разжижения и вязкость эякулята, pH являются
• микроскопический анализ эякулята, при котором определяют характеристики клеточных элементов спермы, а именно: количество сперматозоидов, подвижность сперматозоидов, морфологические характеристики сперматозоидов, количество и типы лейкоцитов, количество и типы незрелых клеток сперматогенеза и пр.

Представления о том, какими характеристиками обладает эякулят фертильного мужчины, менялись с течением времени.
В настоящее время в России (а также в СССР в прошлом) не существует специальных документов Минздравсоцразвития, устанавливающих нормы фертильного эякулята. Медицинские учреждения в праве оценивать фертильность эякулята по собственным нормам. Большой популярностью пользуются нормы, предложенные Всемирной Организацией Здравоохранения. Распространенность норм ВОЗ настолько велика их могут считаться общепризнанными в настоящее время, а книга «Руководства ВОЗ по лабораторному исследованию эякулята человека и взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью» является наиболее авторитетным изданием, посвященным правилам проведения спермограммы.

В издании «Руководства ВОЗ по лабораторному исследованию эякулята человека и взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью» (Cambridge University Press, 1999 год) предложены следующие нормативные показатели фертильного эякулята:

«Новые » нормы ВОЗ 2010 года

В 2010 году Всемирная Организация Здравоохранения (ВОЗ) внесла новые изменения в референсные значения показателей эякулята, изменив методику его обработки и исследования. В последнем, 5 издании «WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen», изменены нормы количества и подвижности сперматозоидов, количества нормальных форм сперматозоидов. Так, например, упразднена классификация подвижных спермиев: по группам а, b, c, d. Вместо этого предлагается классификация сперматозоидов с прогрессивным движением, непрогрессивным движением и неподвижные.

Ниже приводятся нормы показателей эякулята, согласно новейшим рекомендациям ВОЗ 2010 года:

Эякулят, соответствующий принятым нормативным значениям, называют нормальным и состояние этого эякулята обозначают термином «нормоспермия», или «нормозооспермия».
ВОЗ предлагает следующие термины для описания патологических состояний эякулята:

• Олигозооспермия - концентрация сперматозоидов ниже нормативного значения
• Астенозооспермия - подвижность сперматозоидов ниже нормативного значения
• Тератозооспермия - морфология сперматозоидов ниже нормативного значения
• Азооспермия - отсутствие сперматозоидов в эякуляте
• Аспермия - отсутствие эякулята (в таком значении соответствует термину «анэякуляция», но некоторые специалисты используют термин «аспермия» для описания эякулята, в котором отсутствуют не только сперматозоиды, но и незрелые клетки сперматогенеза)

• олигоспермия - объем эякулята ниже нормативного значения
• лейкоцитоспермия, так же лейкоспермия, так же пиоспермия - концентрация лейкоцитов выше нормативного значения

• акиноспермия (акинозооспермия) - полная неподвижность сперматозоидов,
• некроспермия (некрозооспермия) - отсутствие живых сперматозоидов в эякуляте,
• криптоспермия (криптозооспермия) - предельно малое количество сперматозоидов, которые могут быть обнаружены в эякуляте с большим трудом, после центрифугирования спермы.
• гемоспермия - присутствие крови (эритроцитов) в эякуляте.

Условия получения эякулята

Мужчинам перед сдачей спермы для анализа рекомендовано воздержание от половой жизни и мастурбации в течение 2-7 дней. Этот период рекомендован для стандартизации условий проведения анализа, для того чтобы можно было сравнивать результаты, полученные в разных лабораториях. Также обычно рекомендуют за 2-5 дней избегать чрезмерного употребления крепких спиртных напитков (хотя влияние алкоголя на качество спермы в этот период не показано). Также в течение нескольких дней до анализа следует избегать посещения саун, парных, термальных ванн и прочих помещений с очень высокой температурой, так как высокая температура снижает подвижность сперматозоидов.

Наиболее распространенным способом получения спермы для анализа является мастурбация. Этот метод рекомендован ВОЗ. Иные методы имеют недостатки. К ним относятся: прерванный половой акт и использование специального медицинского презерватива без смазки. Эякулят получают в посуду, предложенную соответствующим медицинским учреждением. Как правило, используют специальные стерильные стаканчики для сбора жидких биологических выделений. Возможно получение эякулята вне медицинского учреждения с последующей транспортировкой.

Время разжижения эякулята и вязкость

Нормальная сперма сразу после эякуляции представляет собой коагулят, или попросту вязкую жидкость. С течением некоторого времени сперма становится жидкой. Этот период времени называют «время разжижения». Обычно эякулят разжижается в течение 15-60 минут. Если эякулят не разжижается в течение 1 часа, то как правило, он уже не разжижается вовсе.

Разжижение эякулята определяют по так называемой «длине нити». Стеклянной или пластиковой палочкой (пипеткой) касаются эякулята и поднимают палочку над поверхностью эякулята, если за палочкой тянется «нить» более 2 см, то эякулят не разжижен. Для определения «длины нити» в современной медицине чаще пользуются выпусканием эякулята из 5 мл серологической пипетки. «Длина нити» характеризует параметр «вязкость». Вязкость и время разжижения - связанные параметры.

Вязкость сперме придает гликопротеин семеногелин, который образуется в семенных пузырьках. Функции семеногелина до конца не известны, предполагается, что он связывается с лигандами на поверхности сперматозоидов и поддерживает их в неактивном состоянии. Во время эякуляции к сперматозоидам и соку семенных пузырьков подмешивается сок предстательной железы, который содержит так называемый «специфический антиген простаты». Этот протеолитический фермент разрушает семеногелин, что приводит к разжижению спермы и предположительно переводит сперматозоиды в активное состояние (наряду с прочими факторами). Неразжижение эякулята указывает на дисфункцию предстательной железы.

Поскольку повышенная вязкость эякулята может повлиять на достоверность микроскопического анализа, то не разжижившийся в течение 1 часа эякулят следует искусственно разжижить с помощью протеолитических ферментов.

Объем эякулята

Объем эякулята обычно измеряют с помощью градуированной серологической пипетки (одновременно определяют вязкость). В большинстве лабораторий объем эякулята менее 2 мл считают не соответствующим норме, состояние такого эякулята характеризуют как «олигоспермия». Основной объем эякуляту придают сок семенных пузырьков (около двух третей объема) и сок предстательной железы (около одной трети объема). Недостаточность объема эякулята может быть вызвана ретроградной эякуляцией, дисфункцией, гипоплазией семенных пузырьков, дисфункцией предстательной железы, гипогонадизмом, непроходимостью (полной или частичной) семявыбрасывающих протоков, коротким периодом воздержания от половой жизни перед сдачей спермы для анализа.

Кислотность (pH) эякулята

Кислотность эякулята определяют после разжижения с помощью индикаторной бумаги или pH-метра. В качестве нормального показателя ВОЗ рекомендует значение pH не менее 7,2. Эякулят большинства мужчин имеет pH 7,8-8,0.

Цвет и запах эякулята

Цвет эякулята в современной медицине не имеет серьёзного диагностического значения, его фиксация на бланке спермограммы - дань традиции. По традиционным представлениям нормальный эякулят имеет «беловато-сероватый» цвет, иногда его характеризуют как «опалесцирующий», «мутно-белый». Прозрачный эякулят может указывать (но не обязательно) на содержание малого количества сперматозоидов в эякуляте. Желтоватый или розоватый оттенок эякулята иногда связывают с гемоспермией. Следует отметить, что микроскопический анализ с точностью определяет количество сперматозоидов и эритроцитов в сперме, поэтому нет необходимости в фиксации цвета эякулята.

Некоторые лаборатории фиксируют запах эякулята. Его характеризуют как «специфический» (в некоторых устаревших медицинских книгах (например, в Руководстве ВОЗ… 1991 г.) сравнивают с запахом цветов каштана). Запах эякуляту придает вещество спермин, секретируемое предстательной железой. Функции спермина неизвестны. Некоторые андрологи по запаху эякулята судят о секреторной активности предстательной железы, однако диагностическая ценность такого подхода спорна.

Количество сперматозоидов

Количество сперматозоидов выражают в относительном значении (концентрация или количество в 1 мл эякулята) и в абсолютном значении (общее количество в эякуляте). Для определения количества сперматозоидов используют счетные камеры - устройства, позволяющие наблюдать в микроскоп сперматозоиды в определенном объеме жидкости (это позволяет путем арифметических действий определить количество сперматозоидов в 1 мл, то есть концентрацию). Для подсчета сперматозоидов используют либо счетные камеры для форменных элементов крови - гемацитомеры («Камера Горяева», камера «Неубауэра»), либо, что оптимально, специальные счетные камеры для спермы («Камера Маклера» и пр.) Также существуют быстрые методы определения концентрации, например, подсчет сперматозоидов на предметном стекле. Если накрыть каплю спермы 10 мкл покровным стеклом 22х22, то количество сперматозоидов в поле зрения микроскопа на увеличении х400 будет приблизительно равно количеству миллионов сперматозоидов в 1 мл эякулята. Существуют компьютеризированные системы определения концентрации сперматозоидов - так называемые сперманализаторы. Такой прибор представляет собой микроскоп с установленной видеокамерой и системой оценки изображения.

При всех методах определения количества сперматозоидов сначала получают данные по концентрации. Затем путем умножения концентрации на объем получают данные об общем количестве сперматозоидов в эякуляте. По предложению ВОЗ нормальный эякулят имеет не менее 15 млн сперматозоидов в 1 мл объема или не менее 39 млн во всем объеме. Состояние эякулята с меньшим количеством сперматозоидов характеризуется как «олигозооспермия».

Иногда количество сперматозоидов настолько мало, что не может быть выражено в определенной концентрации (допустим врач увидел только несколько сперматозоидов, изучив не одну пробу эякулята). В этом случае говорят о «единичных сперматозоидах в поле зрения», «единичных сперматозоидах на препарате» или «единичных сперматозоидах в эякуляте». Иногда сперматозоиды можно обнаружить, только проведя осаждение спермы в центрифуге и исследовав с помощью микроскопа осадок.

Подвижность сперматозоидов

По подвижности сперматозоиды разделяют прогрессивно-подвижные, непрогрессивно-подвижные и неподвижные. Предполагается, что достичь яйцеклетку способны только прогрессивно-подвижные сперматозоиды. По предложению ВОЗ эякулят считается нормальным, если доля прогрессивно-подвижных сперматозоидов будет не менее 32%. Состояние эякулята, не удовлетворяющее данным условиям, характеризуется как «астенозооспермия».

Анализ морфологической нормальности сперматозоидов

Анализ морфологической нормальности сперматозоидов или попросту «морфология сперматозоидов» выполняется с помощью микроскопа. Врач-лаборант определяет долю сперматозоидов, чей вид соответствует норме, и долю сперматозоидов с аномальной морфологией. Для анализа используют либо нативную сперму, либо приготовляют окрашенный на стекле мазок спермы. Окраска мазка производится гистологическими красителями, в простейшем случае гематоксилином, в более сложных случаях производят комплексную окраску по методам Шорра, Папаниколау или Романовского-Гимзе.

В сперме всегда содержится большое количество аномальных сперматозоидов. Аномальная морфология может касаться строения головки (аномальная форма, размер, отсутствие или уменьшенная акросома), строения шейки и средней части (искривление, аномальный размер), жгутика (искривление, отсутствие или множественное количество жгутиков, размер). ВОЗ не дает однозначных рекомендаций относительно того, какая доля аномальных сперматозоидов допустима в нормальной сперме. В издании «Руководства…» 1992 года упор был сделан на рекомендации исследовать морфологию в нативном эякуляте с помощью оптики «светлого поля»; при таком методе доля аномальных сперматозоидов не должна превышать 50 % в нормальном эякуляте. В издании «Руководства ВОЗ» 1999 года упор сделан на рекомендации исследовать морфологию в нативном эякуляте с помощью оптики «фазового контраста»; при таком методе доля аномальных сперматозоидов не должна превышать 70 % в нормальном эякуляте. Но в этом же издании также рекомендуется использовать так называемые «Строгие критерии Крюгера» для исследования морфологии на окрашенном мазке спермы. Согласно этим критериям (применимым только для мазка) доля аномальных сперматозоидов не должна превышать 85 %. Таким образом, установление норм количества аномальных сперматозоидов зависит от метода оценки морфологии сперматозоидов. Наиболее точным методом считается исследование окрашенного мазка по критериям Крюгера, предполагающим наличие не менее 4% нормальных сперматозоидов.

Схема атипичных форм сперматозоидов человека по Крюгеру

Состояние эякулята, не удовлетворяющее нормам по морфологии сперматозоидов, характеризуется как «тератозооспермия».

Жизнеспособность сперматозоидов

Жизнеспособность сперматозоидов характеризуется долей живых сперматозоидов. Подвижный сперматозоид всегда живой. Неподвижный сперматозоид может быть либо живым, но с нарушенными функциями движения, либо мертвым. ВОЗ предлагает в качестве нормы жизнеспособности - не менее 50 % живых от общего числа. Таким образом, если доля подвижных сперматозоидов 50 % и более, то нет необходимости в проведении специального исследования на жизнеспособность. Этот параметр имеет смысл исследовать при астенозооспермии. Наиболее распространены два метода оценки жизнеспособности сперматозоидов. Оба метода основаны на факте нарушения целостности наружной мембраны у клетки вскоре после ее гибели.

• «Суправитальное окрашивание эозином» основано на неспособности этого красителя проникать через клеточные мембраны. Таким образом, эозин не может проникнуть внутрь живого сперматозоида. Эозин проникает внутрь мертвого сперматозоида (поскольку целостность его наружной мембраны нарушена) и окрашивает его в розовый цвет. Для осуществления окрашивания каплю спермы на предметном стекле смешивают с каплей 0,5 % водного раствора эозина (5 г/л эозина 9 г/л раствора хлорида натрия)и исследуют препарат с помощью микроскопа. Мертвые сперматозоиды окрашены в розовый цвет.
• «Гипоосмотический тест» основан на набухании живых сперматозоидов, помещенных в гипотонический раствор, мертвые сперматозоиды не набухают. Для осуществления теста 1 каплю спермы добавляют к 10 каплям раствора цитрата натрия (0,735 г/л) и фруктозы (1,351 г/л), смесь выдерживают 30-120 мин при 37 градусах по Цельсию, затем исследуют с помощью микроскопа. Живые сперматозоиды набухают, что выражается в искривлении хвостов (образуются петли), мертвые сперматозоиды не меняют свою форму.

Округлыми, или круглыми, клетками называют нежгутиковые клеточные элементы спермы. Другими словами, округлые клетки - все, что не сперматозоиды. В это собирательное понятие входят две различные по происхождению группы клеток: лейкоциты и так называемые «незрелые клетки сперматогенеза». Понятие «округлые клетки» появилось, потому что невозможно средствами световой микроскопии отличить в нативном эякуляте лейкоциты от незрелых клеток сперматогенеза. Клетки, нетипичные для эякулята (эритроциты, эпителиальные клетки семявыносящих путей и пр.) к «округлым клеткам» не относят. Диагностическая значимость параметра «количество округлых клеток» не ясна. Когда-то ВОЗ предложила норму не более 5 млн/мл, обосновывая ее тем, что при превышении количества округлых клеток 5 млн/мл велика вероятность превышения нормы содержания лейкоцитов (не более 1 млн/мл). Впоследствии норма «не более 5 млн/мл» была упразднена.
Незрелыми клетками сперматогенеза называют клетки сперматогенного ряда, то есть предшественники сперматозоидов. К ним относят сперматогонии, сперматоциты первого и второго порядков и сперматиды. В эякуляте всегда содержатся незрелые клетки сперматогенеза, их количество сильно варьирует (обычно 2-5 млн/мл, но может достигать нескольких десятков млн. в 1 мл). По всей видимости, количество незрелых клеток сперматогенеза не имеет диагностического значения.

Согласно распространенной точке зрения повышенное содержание лейкоцитов в сперме может свидетельствовать о наличии воспалительных процессов в придаточных половых железах (предстательная железа, семенные пузырьки). По предложению ВОЗ нормальный эякулят имеет не более 1 млн лейкоцитов в 1 мл. Состояние эякулята с большим количеством лейкоцитов характеризуется как «лейкоцитоспермия».

Подавляющее большинство лейкоцитов в сперме представлено нейтрофильными сегментоядерными гранулоцитами. Остальные типы лейкоцитов в нормальном эякуляте встречаются редко, поэтому методы выявления лейкоцитов направлены на выявление сегментоядерных гранулоцитов. В нативном неокрашенном эякуляте невозможно достоверно отличить гранулоциты от незрелых клеток сперматогенеза. Простейшим методом выявления гранулоцитов является микроскопия окрашенного мазка спермы. Достаточно обработать мазок спермы любым красителем, окрашивающим ядро, например, гематоксилином. Округлые клетки с сегментированными ядрами определяются как гранулоциты. Существуют также методы окраски гранулоцитов с помощью так называемого «пероксидазного теста» - к сперме добавляют бесцветный субстрат, расщепляемый пероксидазой на окрашенный продукт. Гранулоциты имеют в составе пероксидазу, расщепляют субстрат и окрашиваются в желтый цвет.

Выявление лейкоцитов также имеет значение для диагностики причин азооспермии. Обструктивная азооспермия обусловлена непроходимостью семявыносящих путей, секреторная азооспермия обусловлена подавленным сперматогенезом. При секреторной азооспермии в эякуляте обычно присутствуют незрелые клетки сперматогенеза, при обструктивной азооспермии незрелые клетки сперматогенеза отсутствуют (из-за непроходимости половых путей). Если при азооспермии все округлые клетки эякулята определяются как лейкоциты, то велика вероятность обструктивной азооспермии.

Спермагглютинация и спермагрегация

«Спермагглютинация» - специфическое склеивание сперматозоидов, прилипание сперматозоидов друг к другу. Спермагглютинацию следует отличать от так называемой «спермагрегации» - неспецифического склеивания вследствие присутствия в сперме слизи. Спермагрегация является вариантом нормы и клинического значения не имеет. При спермагглютинации подвижные сперматозоиды образуют небольшие группы склеивания - несколько сперматозоидов склеиваются одинаковыми частями своей клетки - «головка к головке» или «хвост к хвосту» или «шейка к шейке». Подобные группы склеивания иногда называют «розетки». Как правило, количество розеток невелико - одно на несколько полей зрения микроскопа, но может носить и массовый характер. Округлые клетки в агглютинации не участвуют и в состав «розеток» не входят. При агрегации сперматозоиды образуют большие скопления (от десятков до сотен). Такие скопления часто образуют форму «тяжа» и включают в себя округлые клетки.

Литература

1. «WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen», 5-d edition, 2010
2. Руководство ВОЗ по лабораторному исследованию эякулята человека и взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью» (Cambridge University Press, 1999 год)
3. ru.wikipedia.org
4. Adapted from Kruger et al., 1993 and reproduced by permission of MQ Medical.